SYBR Green I,SYBR Green I
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SYBR Green I

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包装 50μL
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发货地 湖北
更新日期 2024-07-29
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中文名称:SYBR Green I英文名称:SYBR Green I
保存条件: -20℃避光保存纯度规格: 99%
产品类别: 试剂
含量: 99%包装: 50ul
外观: 液体
2024-07-29 SYBR Green I SYBR Green I 50μL/RMB -20℃避光保存 99% 试剂

规格:50μL

保存:-20℃,避光保存。

 

SYBR Green I 是高灵敏的 DNA 荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单,至少可检出 20pg DNA,高于 EB 染色法 25-100 倍。SYBR Green I 与 dsDNA 结合荧光信号会增强 800-1000 倍,用SYBR Green I 染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低,可适用于多种电泳分析。

SYBR Green I 适合于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳,脉冲电场凝胶电泳以及毛细管电泳等。

SYBR Green I 与双链 DNA 的亲和力非常高,因此可以用做电泳前染色,对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4 连接酶等)没有抑制作用。另外,SYBR Green I 与 EB相比,诱变能力大大降低。

 

使用方法:

注意:染料使用前应在室温下彻底融化混匀后使用。

SYBR Green I  后染方法 (推荐方法)

1. 制作不含染料的凝胶,按照常规方法进行电泳。

 

2. 用 pH 7.0 - 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照 10000:1 的比例稀释 SYBR GreenⅠ浓缩液(如 50ml 1×TAE 中加入 5μl 染料),混匀,制成染色溶液。

注:如要染色 RNA ,按照 5000 :1  比例稀释。

 

3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔盖住容器使染料避光。室温振荡染色 10-30 分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色 30 分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

 

4. 紫外灯下观测。

SYBR Green I  预染方法

1. 6×SYBR loading buffer 预染液的配制:

10000×SYBR浓缩液

6μl

6μl

10×DNA loading buffer

0.6ml

-

6×DNA loading buffer

-

 

1×TE pH8.0

0.4ml

1.0ml

6×SYBR loading buffer预染液

1.0ml

1.0ml

 

6×SYBR loading buffer 预染液避光 2-8℃可以放置一个月以上。

 

2. 制胶:按常规方法制备凝胶,凝胶温度降至 60℃左右时加入 10000×SYBR,使染料终浓度为 1×,如 40ml 凝胶溶液中加入 4μl 染料。

注:如要染色 RNA ,使染料终浓度为 2 ×(如 40ml  凝胶溶液中加入 8μl  染料)。

3. 样品预染:取 1-2μl 6×SYBR loading buffer 预染液与电泳样品和 Marker 混合,室温预染3-5 分钟。

4. 上样、电泳后紫外灯下观察。

 

使用注意事项

1.后染方法是推荐方法,能得到更好的电泳结果;由于 SYBR 对样品过量非常敏感,预染方法容易出现条带扭曲变形(建议泳道中每条带的含量不要超过 5ng),请根据实际情况摸索出适合自己的实验程序,

2. SRBR 对电泳缓冲液的 pH 要求严格,有效 pH 为 7.5-8.0,电泳时尽量使用新鲜配制的缓冲液,并保证合适的 pH 范围。

3. SYBR Green 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

4. 使用酒精沉淀核酸中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。

5. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blot,建议在预杂交和杂交溶液中加入0.1%- 0.3% 的 SDS,可以有效去除 SYBR。

6. 在紫外下观察,与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA 则颜色为橘黄。

 

 

 

 

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关键字: SYBR Green I

公司简介

康迪斯化工(湖北)有限公司是一家立足于生命科学领域有自主知识产权的高新技术企业,主要从事生物试剂的研发与生产,并以持续探索和开发生命科学技术为动力,致力于为科研工作者提供实用、高效的科研试剂,为生命科学的研究与发展提供有意义的帮助。
成立日期 2019-03-14 (6年) 注册资本 200万
员工人数 10-50人 年营业额 ¥ 1000万-5000万
主营行业 无机化工,中间体,生物化工,有机原料,化学试剂 经营模式 贸易,工厂,试剂
  • 康迪斯化工(湖北)有限公司
VIP 5年
  • 公司成立:6年
  • 注册资本:200万
  • 企业类型:生产经销
  • 主营产品:异氰酸酯,聚硫橡胶,润滑油
  • 公司地址:江岸经济开发区石桥科技产业园5栋
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