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产品简介
Schiff试剂又称雪夫试剂、希夫试剂等,是Schiff于1866年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(-CHO)。Schiff试剂主要成分是副品红碱,为三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基是品红显色原因。在酸化的品红液中加入亚硫酸或者亚硫酸盐,品红被还原为品红-亚硫酸(或称白亚磺酸),即Schiff试剂。
主要成分:主要由碱性品红、偏重亚硫酸钠、双蒸水等组成,过滤并且无色处理。
希夫试剂的用途: Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10% 的福尔马林,常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2 次。
4、置于过碘酸溶液中,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
5、自来水冲洗1 次,再用蒸馏水浸洗2 次。
6、样本放入Schiff Reagent,置于室温阴暗处,浸染10~20 m in。
7、自来水冲洗10min。
8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自来水冲洗10~15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。
12、二甲苯透明。
13、中性树胶封固。
染色结果:
PAS 反应阳性物质(糖原或多糖)呈红色或紫红色
阴性对照(可选):
1、对照切片可以用唾液,取唾液片(过滤后用)处理30~60 min 后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
2、对照片可以淀粉酶,取淀粉酶1g 于双蒸水或PBS(pH 5.3) 100ml,处理30~60min后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
3、如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。
染色结果:对照片呈阴性反应,无紫红色颗粒。
注意事项
1、Schiff Reagent 应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。
2、Schiff Reagent 在室温过低(小于15℃)情况下反应缓慢,可以置于适宜温水(小于30℃)中恢复后再使用。
3、理想的Schiff Reagent接近于无色,如果试剂颜色呈极轻微粉红色亦可考虑使用。如试剂颜色呈明显的红色,应弃用。
4、颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我们所提供的产品仅供科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或者化妆品等用途!在您向我们订购产品之时,表明您已经知晓我们的产品仅做科研用途,并遵守法律法规!
关键字: 希夫试剂
康迪斯化工(湖北)有限公司是一家立足于生命科学领域有自主知识产权的高新技术企业,主要从事生物试剂的研发与生产,并以持续探索和开发生命科学技术为动力,致力于为科研工作者提供实用、高效的科研试剂,为生命科学的研究与发展提供有意义的帮助。