名称 PAS染色液(糖原染色液)/ PAS Staining Solution 规格 4×50mL | 4×100mL 试剂组分 Compositions 200mL 400mL Storage 试剂(A)过碘酸溶液 50mL 100mL 4 ℃ 避光 试剂(B)Schiff Reagent 50mL 100mL 4 ℃ 避光 试剂(C)苏木素染色液 50mL 100mL RT 避光 试剂(D)酸性乙醇分化液 50mL 100mL RT Manual 1份 1份 / 【注】有效期12个月 自备材料 1、 10%福尔马林固定液 2、蒸馏水 3、乙醇 产品简介 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus 在 1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该 法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及 软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。 过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的 1,2-乙二醇基,使之变为二醛, 醛与 Schiff 试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意 选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步 骤。 本糖原 PAS 染色液的特点: 采用 Phygene 特有配方技术,大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操 作简捷,仅需 1h 左右。 使用参考 操作步骤(仅供参考): 1、常规固定,常采用 10%的福尔马林,常规脱水包埋。 2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗 2~3min,再用蒸馏水浸洗 2 次。 4、置于过碘酸溶液中,室温放置 5~8min,一般不宜超过 10min。 5、自来水冲洗 1 次,再用蒸馏水浸洗 2 次。 6、样本放入 Schiff Reagent,置于室温阴暗处,浸染 10~20min。 7、自来水冲洗 10min。 8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核 1~2min。 9、酸性乙醇分化液分化 2~5s。 10、自来水冲洗 10~15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。 11、逐级常规乙醇脱水。 二甲苯透明,中性树胶封固。 使用结果 PAS 反应阳性物质>>红色或紫红色 细胞核>>蓝色 细胞质>>深浅不一的红色 备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间的长短。 阴性对照(可选): 1、对照切片可以用唾液,取唾液片(过滤后用)处理 30~60min 后,与其他切片共同入过碘酸溶液。 结果应 为阴性。 2、对照片可以淀粉酶,取淀粉酶 1g 于双蒸水或 PBS(pH5.3) 100ml,处理 30~60min 后,与其他切片共同入过 碘酸溶液。结果应为阴性。 3、如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入 Schiff Reagent。染色结果:对照片呈 阴性反应,无紫红色颗粒。 注意事项 1、 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。 2、 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以 18~22℃。 3、 过碘酸溶液和 Schiff Reagent 应置于 4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前, 提前 30min 取出恢复到在室温后,避光暗处使用。 4、 酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而 定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。 5、 在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织的类别等决定。 6、 本染色液常用于常规组织切片染色,对于真菌、细胞、极其薄的切片,建议采购糖原 PAS 染色试剂盒(细 胞真菌专用), 因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度更低,不宜过染。 7、 冷冻切片染色时间尽量要短。 8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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