名称 PCR Reaction Kit (2000bp) | PCR反应试剂盒(2000bp) 规格 20T 存储 -20℃,有效期一年。 产品简介 本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂,可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA;引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物;2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。 使用本试剂盒进行PCR反应后,PCR产物大小应为2000bp。 试剂盒组成 组成 浓度 体积 模板 10 ng/μl 30 μl 上游引物(2000 FW) 10 μM 30 μl 下游引物(2000 RV) 10 μM 30 μl 2×Taq PCR MasterMix(含染料) - 2×500 μl 去离子水 - 1 ml 实验步骤 1. 冰浴中彻底融化模板,引物和2×Taq PCR MasterMix,混匀后快甩离心将溶液收集到管底。 2. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系: / 50μl反应体系 上游引物(2000FW) 10μM 1 μl 下游引物(2000RV) 10μM 1 μl 模板 1 μl 2×Taq PCR MasterMix 25 μl 水 22 μl 3. 快甩离心将反应液收集到管底。 4. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。 5. PCR仪上执行以下程序: 步骤 温度 时间 循环数 初始变性 94℃ 5 min 1 变性 94℃ 30 sec 30 退火 54℃ 30 sec 延伸 72℃ 2 min 最后延伸 72℃ 5 min 1 6. 反应完成后,取5ul反应液,1%琼脂糖凝胶电泳,观察条带情况。
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