Cat. No.: EZB-RT2GQ 一、试剂盒简介 本试剂盒为包含去除基因组DNA的高效DNase的新一代快速逆转录试剂盒,与上一代产品相比具有更高的逆转录效率。试剂盒中主要包含3管成分:gDNA Remover中主要包括浓缩的DNase及Buffer;4× EZscript RT Mix II中主要包含了逆转录所需的所有成分(逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTPs、Oligo dT18、Random Hexamer等)。 本试剂盒采用的DNase及Buffer反应系统经过特殊的优化,仅需室温(25°C)反应5分钟,就能降解95%以上的基因组DNA,极大的降低了可能残留的基因组对结果的干扰。 本试剂盒采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,扩增效率尤佳,同时采用了最新优化的反应体系,进一步提高了逆转录效率。使用本试剂盒逆转录15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量(Ct值相同)。后续逆转录产物建议用于PCR、qPCR,不建议用于基因克隆。 二、产品组分
*1:包括DNase和Buffer; *2:包括逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、Oligo(dT)18 Primer、Random Hexamer Primer等组分。 三、保存条件 本试剂盒建议置于-20℃保存。 四、试剂盒特点 1、本试剂盒为预先混好的4× EZscript RT Mix II,只需加入模板RNA和水混匀后便可以开始反应;使用了新一代逆转录酶,具有更强的酶活性和更高的灵敏度。 2、含有去除基因组DNA的gDNA Remover,只需室温5分钟即可去除基因组DNA。 3、只需42℃、15分钟即可高效合成荧光定量PCR所需的高质量cDNA模板。 4、反转录引物使用了Oligo(dT)18和Random Hexamer这两种引物的混合物,极大提高了反转录的效率。 5、反转录反应可选择多种仪器如水浴锅、金属浴,不局限于PCR仪。 五、注意事项 1、当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。 2、 gDNA Remover和4× EZscript RT Mix II在使用前需上下颠倒混匀,短暂离心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。 3、分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
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