一站式RNA电泳套装

一站式RNA电泳套装

产品及特点本产品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA 上样液、电泳液等在内的 RNA 电泳套装，专门用于 RNA 电泳分析。可以进行至少 10 次 mini 变性胶电泳。

1. 即开即用，用户不需要自己进行 RNase 灭活、高压灭菌、pH 调节等操作。

2. 与 Northern 杂交等后续反应兼容。 
规格及成分 成 份 编 号 大纸盒包装 
琼脂糖 81105 5 g
超纯水 100935 250 mL
甲醛 50-00-0 60 mL
RNAON（含 EB） 3130A 1.5 mL
RNARUN（MOPS 电泳缓冲液），10× 3150 100 mL
使用手册 60904sc 1 份

运输及保存 常温运输和保存，但 RNAon 长期需要-20℃保存，有效期一年。

自备试剂 EB (10 mg/mL)、DEPC 水。

使用方法注意：所有器皿（三角瓶，电泳槽，枪头等）均需去除 RNase。强烈推荐使 用本公司的超强无毒的固相 RNase 清除剂。 

一、配制琼脂糖甲醛变性胶（1.2%, 100 mL）

1. 在三角瓶中加入下列成份: 琼脂糖 1.2 -1.5 g 无菌水 87 mL

2. 将琼脂糖加热融化后，加入 10 mL 10×RNArun（注意：10×RNArun 即 10×MOPS 电泳缓冲液，瓶子一旦打开，就很容易产生污染细菌，细 菌大量繁殖后会释放大量 RNase，所以剩下的 10×RNArun -20℃ 放置）。

3. 待胶冷却至 60?C 左右，再加下列成份: 甲醛 3.0 mL 自备 EB (10 mg/mL) 2-4 ?L 注意：由于本试剂盒提供的 RNAon 中含 EB，所以也可以不加 EB，但 效果较差。如果使用自备的其他染料，如 SYBR Green I，则不能同时使 用其他染料，包括含 EB 的 RNAon，用户需要另购不含 EB 的 RNAon）。

4. 混匀后倒胶, 凝固半小时后即可以使用。

二、配制电泳液

5. 将 RNArun 用超纯水稀释十倍后即成电泳液，所需要的体积根据使用的 电泳槽决定。

三、变性 RNA 样品 

6. 在一干净的离心管中将 5-10 uL RNA 和 15 uL RNAon 混合，85℃保温 10 分钟后冰浴 5-10 分钟，直接上样。注意：每一泳道至多可分析 30 ?g RNA，通常用 10-20 ?g 总 RNA 进行 Northern 杂交，可以检测高丰度 mRNA（占 mRNA 总量的 0.1%以上）；如待测 RNA 含量极微，每个泳 道需加 0.5-3.0 ?g poly(A)+ RNA。

四、电泳

7. 电泳时，将凝胶预电泳 5 min（电压为 5 V/cm）。随后加样品和分子量 对照(如果有的话)，以 3－4 V/cm 的电压电泳，直至染料迁移至胶下游 的 3/4 处。

8. 电泳结束后，在 300 nm 紫外灯下拍照。 五、后续处理

9. 按标准方法进行 Northern 杂交等后续处理。