0.01M柠檬酸钠缓冲液 pH6.0，干粉

柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L，pH6.0 说明书  
货号：PN5360
规格：1L/2L 
保存：室温密封保存，有效期12个月。
产品简介：
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高检测的准确性。
柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L，pH6.0 是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时，考虑进行抗原修复。
按每个片子需要10ml抗原修复液计算，1L抗原修复液可用于100个样本的抗原修复。
操作步骤：
本产品是干粉形式，使用前用去离子水或蒸馏水按产品规格溶解至1L/2L，即可使用。
1. 对于石蜡切片：
a. 脱蜡：二甲苯3 次，每次3-5min→ 无水乙醇2 次，每次3-5min→ 95％乙醇1 次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1 次，3-5min→ 蒸馏水洗2 次，每次3-5min。
b. 抗原修复：将切片浸泡在柠檬酸修复液中，95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min 内，的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片：
用免疫染色洗涤液洗涤切片5 min。将切片浸泡在柠檬酸修复液中，95-100℃加热约15 min (加热时间可以控制在10-20 min 内，的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。柠檬酸修复液使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅，也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30 min 内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2 次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
注意事项：
抗原修复过程可以使用金克隆公司的抗原修复盒进行操作。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴手套操作。