真菌总蛋白质微量提取试剂盒

真菌总蛋白质微量提取试剂盒

产品及特点本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和 Western 印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法，适合于 各种形态的各种酵母材料。本产品的其主要特点是：

1. 破壁效率高，能达到 80-90%。

2. 可以处理各种酵母样品。

3. 操作简单，得到的裂解液可以直接用于 SDS-PAGE 和 Western 印迹分 析。 
规格及成分 成 份 编 号 50 次小纸盒包装
溶液 A LM81202a 100 mL
溶液 B 成分一 LM81202b1 50 mL
溶液 B 成分二 LM81202b2 1.5 g
酸洗玻璃珠，400μm LM100307C 5 g
使用手册 LM81202sc 1 份

运输及保存 常温运输保存，但溶液 B 成分二需-20℃保存，有效期一年。

自备试剂 酵母培养基 

使用方法准备工作：将溶液 B 成分二（干粉）全部加到 50 mL 溶液 B 成分一中，充分摇晃使之全部溶解，成为溶液 B，然后分装成小份（体积根据每次实验的样品数决定）并放-20℃长期保存。

1、 将酵母细胞接种到 5 mL YPD 培养基中，30℃摇晃（250rpm/分钟）过夜培养使其 OD600 达到 0.5～2.0。

2、 把酵母细胞培养物转到装有 2 mL 预冷溶液 A 的 10-15 mL 离心管中，混匀。

3、 4℃ 5000g 离心 5 分钟沉淀酵母细胞，吸出上清液。

4、 用 30 μL 溶液 B 悬浮酵母细胞，并快速转移到 1.5 mL 塑料离心管中。

5、 100℃下保温 3 分钟，使蛋白酶失活，样品存放于-20℃。

6、 加入 0.1g 的玻璃珠。

7、 在旋涡振荡器上剧烈振荡混合 2-10 分钟。

8、 加入 70 μL 溶液 B，稍加振荡，置 100℃保温 1 分钟。

9、 取 5-20 μL 抽提液上样直接进行 SDS-PAGE 凝胶电泳。

注：若蛋白浓度较高，细胞破裂后可用多余溶液 B 适当稀释后再电泳。