检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-1β抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-1β与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。
检测类型:双抗夹心法
形式:预包被96孔板
检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆
上样量:100ul
试剂盒组分:
预包被96孔板、标准品、IL-1β检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(A、B)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。
灵敏度:1.0pg/mL
检测范围: 3.9 - 250 pg/mL
回收率范围:85-107%
保存方法:2-8℃
标准曲线图
背景:
白细胞介素-1(IL-1)蛋白家族成员中包括经典的IL-1α和IL-1β。IL-1受体拮抗剂(IL-1RA)、IL-18、IL-33和IL-1F5-F10,IL-1α和IL-1β有相同的细胞表面结合受体,形式相同的生物学功能。健康人未刺激的细胞是不产生IL-1的,只有皮肤角质形成细胞、一些上皮细胞,以及中枢神经系统的某些细胞是例外。但在响应炎症因子、感染、或微生物内毒素时,IL-1在巨噬细胞和其他类型细胞表达急剧增加。IL-1β在免疫和炎症应答、骨重塑、发热、碳水化合物代谢、GH/IGF-1的生理过程中起重要作用。多种疾病与IL-1表达失调或延时表达相关,其中包括败血症、类风湿关节炎、炎性肠道疾病、急性和慢性髓细胞白血病、胰岛素依赖型糖尿病、动脉粥状硬化、神经损伤和老年退化有关的疾病。
IL-1α和IL-1β是结构相关的多肽,在氨基酸水平约有25%的同源性。两者都是先合成为31kDa前体,然后裂解为大约17.5kDa的成熟蛋白。由Caspase-1/ICE对IL-1β的前体切割是炎症反应的关键步骤。尽管IL-1α和IL-1β都不含有一个典型的疏水信号肽,但有证据表明,它们可以经非经典途径分泌到胞外。未处理的IL-1α部分可在细胞膜上展示,并可能保留生物活性。与IL-1β前体不同,IL-1β前体与成熟的IL-1β相比,具有很少或根本不具有生物活性。IL-1β前体与成熟的IL-1β都运至胞外。
IL-1α和IL-1β通过免疫球蛋白超家族受体与IL-1RA结合发挥其效应。80kDa的I型跨膜受体(IL-1RI)在多种细胞中表达,包括T细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、内皮细胞、滑膜衬里细胞、软骨细胞和肝细胞。68kDa的II型跨膜受体(IL-1RII)在B细胞、中性粒细胞和骨髓细胞中表达。IL-1RI和IL-1RII的胞外区域享有28%的同源性。但其他区域有显著不同:II型受体的胞内域只有29个氨基酸,而I型受体的胞内域有213个氨基酸。IL-1RII似乎对IL-1信号没有响应,其功能是作为诱骗受体从而削弱IL-1的作用。IL-1受体配体蛋白(IL-1RAcP)与IL-1RI相互作用是IL-1RI信号传导所必需的。IL-1RA是分泌型分子,是IL-1的竞争性抑制剂。可溶性IL-1RI和IL-1RII存在于人的血浆、关节液、及几种细胞株的条件培养基中。此外,牛痘病毒编码类似于可溶性IL-1RII的IL-1结合蛋白。
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