检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 IL-2抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-2与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。
检测类型:双抗夹心法
形式:预包被96孔板
检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆
上样量:100ul
试剂盒组分:
预包被96孔板、标准品、抗小鼠 IL-2检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(A、B)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。
灵敏度:3.5 pg/mL
检测范围:15.6 - 1,000 pg/mL
回收率范围:84-107%
保存方法:2-8℃
标准曲线图
背景:
白细胞介素 2 (IL-2,也称为 TCGF) 是一个 15-16 kDa 单体α螺旋糖蛋白, 属于 I 型细胞因子家族。 小鼠 IL-2 前体是含 169 个氨基酸(AA) 的多肽, 它包含一个由20 个氨基酸组成的信号序列和一个由 149 个氨基酸组成的成熟链。 另外还有一个 O-连接糖基化的潜在位点, 以及在 35-46 残基处的多聚谷氨酰胺区。值得注意的是, 小鼠 IL-2有多个等位基因, 导致小鼠的 IL-2 序列(SwissProt#:P04351) 在 21-46 氨基酸处的谷氨酰胺数量及 TSSS 重复次数的不同。 成熟的小鼠 IL-2 氨基酸序列与人合大鼠的 IL-2分别有 56%和 73%的同源性, 主要差异位于聚谷氨酰胺区。 小鼠和人的 IL-2 存在一定交叉性。 在功能上, IL-2 最初被认为是 T 细胞生长因子, 因此, 被用于对癌症和艾滋病患者的治疗, 以及提高免疫反应。 然而, 这些努力效果有限。 实验研究显示,缺乏 IL-2 或 IL-2 受体的小鼠, 也可产生淋巴细胞增生和患自身免疫性疾病, 表明 IL-2是一个限制增长, 而不是诱导增长的因子。 最近的研究表明, 淋巴细胞增生的真正原因是无法产生 CD4+FoxP3+CD25/IL-2Rα+ Treg 细胞。 值得注意的是, 现在IL-2 被认为是成功诱导 CD8+记忆细胞回忆应答的必要条件。 总所周知, 表达 IL-2的哺乳动物细胞包括 CD4+和 CD8+T 细胞、 NK 细胞、 NKT 细胞和树突状细胞。 IL-2受体很复杂, 由三个不同亚基组合而成。 其中两个亚基可与配体结合,被称为 IL-2Rα和 IL-2Rβ。IL-2Rα为 55 kDa, 凭借低亲和力与 IL-2 结合。IL-2β为 75 kDa,也是 IL-15 受体的组成部分,中等亲和力与 IL-2 结合。信号转导通过 IL-2Rβ和一个 64kDa的共同γ链(γc) 来完成。 γc 与 IL-4, -7, -9, -15 和-21 共享受体。 信号转导γc 不与 IL-2结合, 但与 IL-2Rβ异源二聚体化, 形成一个功能性 IL-2 受体。 异源三聚体α-β-γc 受体可能与 IL-2 结合, 形成 Rα-Rβ复合体。
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