GC-rich PCR Buffer (4种套装)

GC-rich PCR Buffer (4种套装)

GC-rich PCR Buffer (4管套装)提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer，为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择，大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。
各种GC-rich PCR Buffer可以单独使用，也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。
提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式，便于用户直接选用。
根据相关文献报道，单一的GC-rich PCR Buffer对于某一个高GC含量的DNA片段的扩增效果很好，但对于另外一个高GC含量的DNA片段则很可能会扩增效果不太理想。正因为很难采用一种通用的GC-rich PCR Buffer 完成对于不同的高GC含量DNA片段的扩增，因此对于高GC含量DNA片段的扩增一直是分子生物学操作过程中的一个难点。针对这一实际情况，信裕生物推出了可以给予用户多种条件进行优化组合的4管套装GC-rich PCR Buffer。
本GC-rich PCR Buffer (4种套装)可以适用于各种常见的耐热DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA
polymerase等。
包装清单：

保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
在使用本试剂盒提供的GC-rich PCR Buffer的同时，必须同时使用和DNA聚合酶配套的最终浓度为1X的含镁离子PCR Buffer。
由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在操作时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：

1. 1.PCR反应参数的设置也可以参考特定的耐热DNA聚合酶的说明进行。通常对于扩增高GC含量DNA片段的情况，延伸时间可以比常规的延伸时间适当延长一些。
2. 2.PCR反应体系的设置可以参考特定的耐热DNA聚合酶进行，仅仅添加适量本试剂盒所提供的GC-rich PCR buffer即可。可以参考如下反应体系设置PCR反应：
   ▼

   ▲

   试剂

   最终浓度

   体积

   体积

   双蒸水或Milli-Q水

   -

   (26.75-x)μl

   (10.7-y)μl

   10X PCR Buffer (with Mg²⁺)

   1X

   5μl

   2μl

   5X GC-rich Buffer

   1X

   10μl

   4μl

   dNTP (2.5mM each)

   0.2mM each

   4μl

   1.6μl

   模板DNA

   10pg-1μg*

   xμl

   yμl

   引物混合物(10μM each)

   0.8μM

   4μl

   1.6μl

   Taq DNA Polymerase (5U/μl)

   1.25U/50μl

   0.25μl

   0.1μl

   总体积

   -

   50μl

   20μl
3. 3.也可以尝试采用0.5X GC-rich Buffer:
   ▼

   ▲

   试剂

   最终浓度

   体积

   体积

   双蒸水或Milli-Q水

   -

   (31.75-x)μl

   (12.7-y)μl

   10X PCR Buffer (with Mg²⁺)

   1X

   5μl

   2μl

   5X GC-rich Buffer

   0.5X

   5μl

   2μl

   dNTP (2.5mM each)

   0.2mM each

   4μl

   1.6μl

   模板DNA

   10pg-1μg*

   xμl

   yμl

   引物混合物(10μM each)

   0.8μM

   4μl

   1.6μl

   Taq DNA Polymerase (5U/μl)

   1.25U/50μl

   0.25μl

   0.1μl

   总体积

   -

   50μl

   20μl
4. 4.还可以尝试在PCR反应体系中同时含有2-4种不同的1X GC-rich Buffer或0.5X GC-rich Buffer。以形成不同的组合用于优化PCR反应条件。优先推荐的GC-rich Buffer 及其组合(最终浓度)包括：
   a. 1X GC-rich Buffer A
   b. 1X GC-rich Buffer B
   c. 0.5X GC-rich Buffer B
   d. 1X GC-rich Buffer C 
   e. 2X GC-rich Buffer C
   f. 1X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
   g. 2X GC-rich Buffer C + 1X GC-rich Buffer D
   h. 1X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B 
   i. 2X GC-rich Buffer C + 0.2X GC-rich Buffer B 
5. 5.可以根据初步的PCR扩增效果，再对效果较好的GC-rich Buffer再进行优化组合，进一步优化GC-rich Buffer的组合。最后根据PCR反应的扩增效果，选择的GC-rich PCR buffer或其组合。