EMSA突变探针-HIF-1α (1.75μM)
EMSA突变探针-HIF-1α是用于EMSA(也称gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-HIF-1α的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。 EMSA突变探针-HIF-1α的序列如下: 5'-TCT GTA AAA GAC CAC ACT CAC CTC-3' 3'-AGA CAT TTT CTG GTG TGA GTG GAG-5' EMSA突变探针-HIF-1α中HIF-1α的公认的结合位点发生了突变,从而使HIF-1α无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带不会被抑制。参考下图。 图1. 一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图 1,阴性对照反应(标记探针);2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。 一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。 包装清单:
保存条件: -20℃保存,一年有效。 注意事项: 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明: 1. 用于突变探针的冷竞争反应,可以参考如下反应体系: 突变探针的冷竞争反应:
Nuclease-Free Water
EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)
细胞核蛋白或纯化的转录因子
未标记的突变探针
标记好的探针
总体积
如果使用更大体积的未标记的突变探针,Nuclease-Free Water的体积就要相应减少,使总体积保持不变。
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