"MuM-2B:人眼脉络黑色素瘤传代细胞
细胞背景资料:脉络膜黑色素瘤;女性
MDAMB231细胞系相关产品:MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
Li-7细胞系相关产品:NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MuM-2B:人眼脉络黑色素瘤传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
U-2-OS细胞系相关产品:AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
BC-009细胞系相关产品:MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MuM-2B:人眼脉络黑色素瘤传代细胞
细胞生长特性:贴壁
RPMI No. 1846细胞系相关产品:NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
SNU5细胞系相关产品:NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品:MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞
PC 61.5.3细胞系相关产品:alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
526 mel细胞系相关产品:RTE细胞、293-EBNA细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞
UMR 106细胞系相关产品:SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
Wayne State University-Head and Neck 13细胞系相关产品:NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品:H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
HPAEpiC细胞系相关产品:Colon-38细胞、IMR-90细胞、hRPTC细胞
SIRC细胞系相关产品:YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
OCI-LY-3细胞系相关产品:MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞
HT1080细胞系相关产品:PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞
OVCAR432细胞系相关产品:LU-65M细胞、Malme-3M细胞、H-2030细胞
NH6细胞系相关产品:MonoMac6细胞、WERI细胞、HDQ-P1细胞
Epstein-Barr-1细胞系相关产品:HIT T-15细胞、HCC1359细胞、MDCC-MSB-1细胞
CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
CAL-33细胞系相关产品:COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
NCTC-1469细胞系相关产品:COLO-357细胞、Jeko1细胞、FRhK4细胞
SCC 4细胞系相关产品:JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
H1651细胞系相关产品:OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞
H22-H8D8细胞系相关产品:CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞
C-33A细胞系相关产品:NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
OVCAR4细胞系相关产品:PL45细胞、Duke University 145细胞、H-2195细胞
NCM-460细胞系相关产品:H-2227细胞、H-220细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞
NCI-H69C细胞系相关产品:SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞
SHEP1细胞系相关产品:SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞
MuM-2B:人眼脉络黑色素瘤传代细胞
SNU-407细胞系相关产品:HCC-44细胞、SK UT 1细胞、TE-1细胞
bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品:H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞
MM1.S细胞系相关产品:TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
H292细胞系相关产品:SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
H-1395细胞系相关产品:A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞
AX-Mel细胞系相关产品:TCMK-1细胞、OCUM-1细胞、AE 1201细胞
DF1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、H838细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞
C-Lu-65细胞系相关产品:CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞
3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
Hep-3B细胞系相关产品:Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
32D/cl3细胞系相关产品:H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞
MonoMac1细胞系相关产品:HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞
MDAPC2B细胞系相关产品:M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
MZCRC1细胞系相关产品:PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞
RT-BM-1细胞系相关产品:HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞
Calu6细胞系相关产品:Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞
VERO76细胞系相关产品:AN3CA细胞、SCC090细胞、CAKI.1细胞
GM17346细胞系相关产品:A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
KYSE 410细胞系相关产品:ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞
MDA-134细胞系相关产品:CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞
OVCA-432细胞系相关产品:MRC-5细胞、NCI-H209细胞、SCC90细胞
OV90细胞系相关产品:McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞
IBRS-2细胞系相关产品:Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
HCET细胞系相关产品:NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞
NPC-039细胞系相关产品:MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞
MDAMB134细胞系相关产品:HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞
SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞
WM266-4细胞系相关产品:MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
MOLT 3细胞系相关产品:BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
SCL-1细胞系相关产品:MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞
GP2d细胞系相关产品:CCD19Lu细胞、GM2131细胞、GM637细胞
NCIH128细胞系相关产品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
MuM-2B:人眼脉络黑色素瘤传代细胞
BT474细胞系相关产品:H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
Hs 675.T细胞系相关产品:PanC1细胞、NCIH295R细胞、HIT T-15细胞
BN-CL2细胞系相关产品:SW-1271细胞、B16 BL6细胞、SNU-886细胞
UMR 106细胞系相关产品:SW 1990细胞、L细胞、SNT8细胞
MALME 3M细胞系相关产品:Hs-940细胞、S16细胞、BRL-3A细胞
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上海弘顺生物科技有限公司长期为高校和科研单位等提供优良的科研产品,在生物化学行业内获得良好的客户口碑。目前,公司提供近十万余种科研产品,其中涵盖化学、细胞生物学、分子生物学、免疫学、生物医学等相关领域。同时,我司不断拓展产品种类,为用户提供质量更优、价格更实惠的科研产品。 上海弘顺生物科技有限公司 主营产品有: 1.生化试剂:上海弘顺生物科技有限公司 在上海化学工业区设有生产研发基地。目前,我司生化试剂产品已达60000多种,并呈不断增长态势。经过不断的创新与发展,上海弘顺生物科技有限公司创立了公司自主试剂品牌(品牌:HonSun),为广大科研工作者提供了高品质的实验试剂。我司生化试剂种类涵盖氨基酸类、蛋白质