PinPoint™ Xa Protein Purification System (PinPoint™ Xa 蛋白纯化系统) 被设计用于制备和纯化体内表达的生物素化的融合蛋白。将编码目的蛋白的DNA 克隆到PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体) 的下游,该位置编码的肽段在体内可被生物素化。生物素化融合蛋白在大肠杆菌内生成,然后用SoftLink™ Soft Release Avidin Resin 进行亲和纯化。该树脂是基于专利技术设计的,可将融合蛋白以非变性形式洗脱出来。PinPoint™ Vector(PinPoint™ 载体) 的特点是含有编码内源蛋白酶因子Xa( 发音为"ten a") 的蛋白水解位点,使得纯化标签可从天然蛋白上分离。载体还带有多克隆区域,便于方便地构建融合蛋白。
该系统中含有几种载体,这些载体涵盖了所有可能的有义读码框。此外,该系统还包含有抗生物素蛋白偶联的树脂、链霉亲和素- 碱性磷酸酶、纯化柱和生物素。系统中的PinPoint™ Xa Control Vector(PinPoint™ Xa 对照载体) 含有氯霉素转乙酰基酶(CAT) 基因,用于监控蛋白表达、纯化和加工条件。使用该系统,每升培养物通常的蛋白产量为1-5mg。
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