LoVo Cell:人结肠癌细胞系

"LoVo Cell:人结肠癌细胞系

细胞形态：上皮细胞样

细胞生长：贴壁

细胞背景资料：LoVo建自１９７１年，从诊断为结肠腺癌的５６岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。癌基因Ｃ-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。它在裸鼠中能成瘤。与１０７细胞联合皮下接种５只裸鼠２１天后全部成瘤。表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-３和CC-４。

RPMI7951细胞系相关产品：SK-N-BE(2)-C细胞、HT144细胞、TGW-nu细胞

COLO 679细胞系相关产品：CAOV4细胞、BHK 21细胞、NCIH2066细胞

P3J.HR1K细胞系相关产品：H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞

B16-F0细胞系相关产品：Hs737T细胞、AK细胞、HOEC细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

LoVo Cell:人结肠癌细胞系

细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。

细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)

细胞传代方法：１：３传代，２-３天换液一次

如何进行细胞复苏：１)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入３７℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；２)从３７℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加１０倍以上培养液，混匀；３)离心，１０００rpm，５min；４)弃去上清液，加入含１０%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，３７℃培养箱静置培养；５)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】１)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液；２)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；３)冻存和复苏用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放３７度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有３７度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

HCC1954 BL细胞系相关产品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞

B-3细胞系相关产品：COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞

Glioma 261细胞系相关产品：A431细胞、KYSE450细胞、WM 115细胞

VM Cub 1细胞系相关产品：INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞

MDCK-2细胞系相关产品：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞

细胞生长特性：贴壁生长

LoVo Cell:人结肠癌细胞系

细胞培养无菌操作步骤和注意事项：１.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。２.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待３０min以上，以排尽臭氧。３.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。４.风淋２分钟。５.０.１%水泡手，擦干。６.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。７.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。８.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。９.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口０.５cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。１０.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。１１.操作完毕后恢复工作台面。

细胞形态特性：上皮样

CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞

H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞

LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞

NCIH520细胞系相关产品：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞

AD-293细胞系相关产品：C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

细胞、Hs 888Lu细胞

SU86.86细胞系相关产品：NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞

TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞

LoVo Cell:人结肠癌细胞系

MRC-9细胞系相关产品：NCIH1155细胞、Hep-3B细胞、SNU-C2A细胞

ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞

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MHCC97-L细胞系相关产品：SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞

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NCI-H2171细胞系相关产品：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞

SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品：AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞

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HEK293A细胞系相关产品：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞

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Rat-2细胞系相关产品：KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞

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U-138MG细胞系相关产品：NS-20Y细胞、PC-9S1细胞、HFTF细胞

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CAL85-1细胞系相关产品：COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞

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LoVo Cell:人结肠癌细胞系

Panc-327细胞系相关产品：HCEC-12细胞、SN12C细胞、SNU-C2B细胞

Ej138细胞系相关产品：Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞

Henrietta Lacks cells细胞系相关产品：IM 9细胞、OVHM细胞、MOLT16细胞

Metastatic Variant-522细胞系相关产品：NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞

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T8细胞系相关产品：Lu-65细胞、SK-SH-SY5Y细胞、RCC23细胞

HOP-62细胞系相关产品：LK2细胞、HUTU80细胞、T24细胞

SKCol1细胞系相关产品：AtT 20细胞、NCIH250细胞、OVCAR-8/ADR细胞

Turbot Embryonic Cell line细胞系相关产品：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞

HCC9204细胞系相关产品：BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞

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JURKAT E-6.1细胞系相关产品：MEL细胞、NCI-H2135细胞、HS688AT细胞

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