"HCC827 Cell:人非小细胞肺癌细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:这株细胞建于1994年三月。这株肺腺癌在EGFR酪酸激酶区域有一个获得性突变(E746-A750缺失)。患者在25岁到26岁时每个月抽1包烟。在诊断前12年不再抽烟。 SJRH 30细胞系相关产品:NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞 3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞 RPMI1846细胞系相关产品:KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞 NCI-SNU-886细胞系相关产品:SJSA-1细胞、MGC-803细胞、R 2 C细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 HCC827 Cell:人非小细胞肺癌细胞系 细胞培养相关问题总结:冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂;细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题;可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活;培养细胞时应使用5%或10%CO2?或根本没有影响?一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时,细胞培养时应使用10%CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时,则应使用5%CO2培养细胞。何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素?除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:消化5分钟。1:2。4-5天长满。 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 NCI-H82细胞系相关产品:VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞 BRL细胞系相关产品:HEK293细胞、LAD 2细胞、Hs 445细胞 T-CAM2细胞系相关产品:SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞 Vx-2细胞系相关产品:HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞 RH35细胞系相关产品:Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞 细胞生长特性:贴壁生长 HCC827 Cell:人非小细胞肺癌细胞系 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 细胞形态特性:上皮细胞样 J82 COT细胞系相关产品:TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞 SCC-15细胞系相关产品:MKN 28细胞、SK-MEL-1细胞、OB2细胞 Lu-99A细胞系相关产品:P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞 HEK293-FT细胞系相关产品:SVEC 4-10细胞、LM2-4175细胞、PL12细胞 LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞 SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞 Hs1.Tes细胞系相关产品:hCMEC/D3细胞、UT7细胞、RPTEC/TERT 1细胞 HCC827 Cell:人非小细胞肺癌细胞系 BEL7405细胞系相关产品:GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞 SK-MEL-1细胞系相关产品:BV173细胞、ACC-M细胞、MDA-436细胞 293-EBNA1细胞系相关产品:NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞 TGW细胞系相关产品:Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞 H-747细胞系相关产品:HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞 NK-92细胞系相关产品:WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞 NCIH2106细胞系相关产品:GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞 MMVECs细胞系相关产品:MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞 SHG44细胞系相关产品:HEK293S细胞、SGC-7901/DDP细胞、T24(ECV304)细胞 MDA-453细胞系相关产品:JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞 NCI-H748细胞系相关产品:ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞 SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞 HCC9204细胞系相关产品:BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞 NCTC-3960细胞系相关产品:JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞 Wien 133细胞系相关产品:NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞 OCI-LY-3细胞系相关产品:MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞 Tb 1-Lu细胞系相关产品:BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞 NPC-TW-039细胞系相关产品:MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞 AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞 GTL 16细胞系相关产品:FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞 BC3H1细胞系相关产品:T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞 MCFs细胞系相关产品:HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞 SCC90细胞系相关产品:COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞 Earles's cells细胞系相关产品:BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞 LM8细胞系相关产品:ECV 304细胞、PK-13细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞 TEV-1细胞系相关产品:4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞 MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞 138 MG细胞系相关产品:HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞 CDC/EU.HMEC-1细胞系相关产品:NCIH2227细胞、SKN-SH细胞、NCI-H209细胞 CNE2细胞系相关产品:WEHI 3细胞、HuPT3细胞、ECV细胞 NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞 H-526细胞系相关产品:HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 SP2细胞系相关产品:CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞 SVG(P12)细胞系相关产品:BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞 A-172MG细胞系相关产品:HLEpiC细胞、SKG IIIa细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞 MKN74细胞系相关产品:AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 NB1-RGB细胞系相关产品:D10.G4.1细胞、SW 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