SNU-387 Cell:人肝癌细胞系

"SNU-387 Cell:人肝癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
H2052细胞系相关产品：K-562细胞、P560细胞、L cells (TK-)细胞
MCF10-A细胞系相关产品：ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
T 84细胞系相关产品：SACC83细胞、Strain L-929细胞、BCP1细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SNU-387 Cell:人肝癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
R D细胞系相关产品：CAL 120细胞、MDA-MB-175VII细胞、SUM 149细胞
GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
AAV293细胞系相关产品：COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
MIN-6细胞系相关产品：SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
U138细胞系相关产品：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
细胞生长特性：贴壁生长
SNU-387 Cell:人肝癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：上皮样
HEK (AD293)细胞系相关产品：WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞系相关产品：MDA-PCa-2b细胞、HT-22细胞、293FT细胞
MDA-175细胞系相关产品：Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞
HBL 100细胞系相关产品：RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞
NCIH2196细胞系相关产品：HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
PTK2细胞系相关产品：JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞
MGC803细胞系相关产品：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
SNU-387 Cell:人肝癌细胞系
H19-7细胞系相关产品：GM07404细胞、OCI AML2细胞、SCL-II细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞
WiDr细胞系相关产品：HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞
B16F0细胞系相关产品：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
UPCI-SCC-90细胞系相关产品：OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞
MPP-89细胞系相关产品：Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
MPP-89细胞系相关产品：Adeno-293细胞、COLO 738细胞、IBRS2细胞
THP 1细胞系相关产品：HUT-226细胞、C2C12细胞、KMS-26细胞
H-740细胞系相关产品：UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞
PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
H2405细胞系相关产品：BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
HTR8细胞系相关产品：JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
MeT-5A细胞系相关产品：A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
OP9细胞系相关产品：SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞
HREC细胞系相关产品：H-1672细胞、J.E6-1细胞、PLC-PRF-5细胞
Hs 766.T细胞系相关产品：NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
Pa16C细胞系相关产品：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞
KBM5细胞系相关产品：KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞
SW 1088细胞系相关产品：NTera2/D1细胞、Hs888T细胞、ECV 304细胞
CAL12T细胞系相关产品：L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞
KP4细胞系相关产品：NS653细胞、F9细胞、VP229细胞
SW780细胞系相关产品：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
UACC893细胞系相关产品：H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞
WM115细胞系相关产品：NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
ssMCF7细胞系相关产品：Mc Coy细胞、NCI-H2106细胞、BEL/FU细胞
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
SF-295细胞系相关产品：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞
Bac 1.2F5细胞系相关产品：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
COLO 738细胞系相关产品：T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
THLE-3细胞系相关产品：Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞
MSF细胞系相关产品：H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞
P31/FUJ细胞系相关产品：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
HME1细胞系相关产品：MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞
HCT_116细胞系相关产品：RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
AGS细胞系相关产品：Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
OE19细胞系相关产品：Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞
SNU-387 Cell:人肝癌细胞系
HEK293-EBNA细胞系相关产品：Panc 2.03细胞、Hs746T细胞、U-937细胞
WM-2664细胞系相关产品：Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
J82细胞系相关产品：Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
KMB-17细胞系相关产品：TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞
MES-23.5细胞系相关产品：P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
REC1细胞系相关产品：MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞
HCC941122细胞系相关产品：NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
U373 MG细胞系相关产品：D-341细胞、NUGC-4细胞、H-1395细胞
MPC-5细胞系相关产品：NCI-SNU-886细胞、NCIH1703细胞、MOLM-14细胞
CCD-966SK细胞系相关产品：P3X63Ag8653细胞、H-1836细胞、PJ34细胞
Hs27F细胞系相关产品：LWnt3A细胞、526mel细胞、LS-174T细胞
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