Huh-7 Cell:人肝癌细胞系

"Huh-7 Cell:人肝癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
rRMECs细胞系相关产品：NEC-8细胞、751-NA细胞、U 937细胞
P31-FUJ细胞系相关产品：801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
KYSE 70细胞系相关产品：REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Huh-7 Cell:人肝癌细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DoHH2细胞系相关产品：VMRCRCZ细胞、KYSE 180细胞、H-2291细胞
Namalwa细胞系相关产品：A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞
SNU449细胞系相关产品：BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
OVCAR.4细胞系相关产品：CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞
COLO 824细胞系相关产品：KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
细胞生长特性：贴壁生长
Huh-7 Cell:人肝癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：上皮样
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
SNU-216细胞系相关产品：MHCC97-L细胞、JVM-3细胞、M-NFS-60细胞
Hs840_T细胞系相关产品：LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
CA 46细胞系相关产品：D283 Med细胞、WERI-Rb 1细胞、Colo741细胞
Mouse Podocyte Clone-5细胞系相关产品：DSL-6A/C1细胞、HCEC-12细胞、U-251细胞
H-3255细胞系相关产品：HT 1080细胞、RL95细胞、B16-F10--RED细胞
C-26细胞系相关产品：NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞
Huh-7 Cell:人肝癌细胞系
NCIH2286细胞系相关产品：IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞
NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞
SNU-387细胞系相关产品：H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品：8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
H-1975细胞系相关产品：SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
Onda 11细胞系相关产品：SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品：MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品：MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
FUOV1细胞系相关产品：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
NPC-039细胞系相关产品：MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞
SF 539细胞系相关产品：SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
Hs739T细胞系相关产品：OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞
Y3Ag1.2.3细胞系相关产品：SKLMS1细胞、SNU16细胞、MDA MB 361细胞
B16细胞系相关产品：Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
RGB细胞系相关产品：RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品：SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
HEC1B细胞系相关产品：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
GM02131A细胞系相关产品：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞
EVSA/T细胞系相关产品：OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品：Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品：C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
Hs-27细胞系相关产品：SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
HT 29细胞系相关产品：TM4细胞、G361-mel细胞、SRA01/04 (HLE)细胞
3T3 L1细胞系相关产品：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
OVCAR-8细胞系相关产品：578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
D-407细胞系相关产品：HTR-8细胞、138 MG细胞、SNU1040细胞
RH7777细胞系相关产品：KALS-1细胞、HCC-827细胞、NCI-128细胞
DoHH2细胞系相关产品：VMRCRCZ细胞、KYSE 180细胞、H-2291细胞
H-1930细胞系相关产品：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
MLE-12细胞系相关产品：MDA361细胞、Sp 2817细胞、TMK1细胞
C2A细胞系相关产品：HaCaT细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、Hs445细胞
A375.S2细胞系相关产品：DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
Y3.AG.1.2.3细胞系相关产品：Rat Fetal Lung-6细胞、MES-SA/Dx5细胞、TALL 1细胞
NHRF细胞系相关产品：D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞
MDA468细胞系相关产品：QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
SF 767细胞系相关产品：TSUpr1细胞、ESC细胞、PE/CA-PJ-34细胞
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞
Saos2细胞系相关产品：BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
Huh-7 Cell:人肝癌细胞系
SHP77细胞系相关产品：HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞
NCIH2122细胞系相关产品：LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
SKRC 39细胞系相关产品：JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
3T6细胞系相关产品：L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞
Calu 3细胞系相关产品：MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
U-266 AR1细胞系相关产品：DI TNC1细胞、SU86.86细胞、H1819细胞
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
SSP-25细胞系相关产品：NIH 3T3细胞、MDCK细胞、MCF10-A细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品：OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
NTERA2D1细胞系相关产品：MARC145细胞、OVCA 432细胞、NCI-H1092细胞
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