"SK-N-BE(2) Cell:人神经母细胞瘤细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:1972年11月从一们多次化疗及放疗的扩散性神经母细胞瘤患儿骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞株。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。 有报道称SK-N-BE(2)细胞的饱和浓度超过1x106细胞/平方厘米。细胞形态多样,有的有长突触,有的呈上皮细胞样。 细胞会聚集,形成团块并浮起 H-7721细胞系相关产品:TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞 MKN-28细胞系相关产品:H820细胞、Japanese Tissue Culture-39细胞、HTh 74细胞 373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞 HIEC-6细胞系相关产品:GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 SK-N-BE(2) Cell:人神经母细胞瘤细胞系 细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2传代 常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞 Rat Glomerular Endothelial细胞系相关产品:NCIH747细胞、JeKo-1细胞、NCI747细胞 C33细胞系相关产品:2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品:FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞 GB1细胞系相关产品:COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞 细胞生长特性:贴壁生长 SK-N-BE(2) Cell:人神经母细胞瘤细胞系 正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。 细胞形态特性:上皮细胞样 J774.A1细胞系相关产品:DMS114细胞、UMR 106细胞、RGC-6细胞 OCI Ly3细胞系相关产品:Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞 H-508细胞系相关产品:LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞 HuH28细胞系相关产品:IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞 NG108-15细胞系相关产品:MRAEC细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、AA-Mel细胞 P30-OHK细胞系相关产品:MDA468细胞、KU812-F细胞、H441细胞 CEM C7细胞系相关产品:NPC-TW 039细胞、A2008细胞、BeWo细胞 SK-N-BE(2) Cell:人神经母细胞瘤细胞系 HPC-Y5细胞系相关产品:GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞 HEL 299细胞系相关产品:H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞 Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞 ARO81-1细胞系相关产品:IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞 SCC154细胞系相关产品:Plaepi 34细胞、VM-CUB1细胞、BHT101细胞 COLO 680N细胞系相关产品:SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞 QGY7701细胞系相关产品:U343细胞、CX1细胞、AM细胞 Roswell Park Memorial Institute 7951细胞系相关产品:NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞 H-647细胞系相关产品:Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞 Mc Coy细胞系相关产品:FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞 L-M[TK-]细胞系相关产品:FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞 GM04154B细胞系相关产品:CG-4细胞、HCV-29细胞、SNU-354细胞 CW2细胞系相关产品:Epstein-Barr-2细胞、MJ细胞、HS 683T细胞 L 132细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞 PC14细胞系相关产品:LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞 MUTZ-1细胞系相关产品:SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞 Tokyo Medical and Dental university 8细胞系相关产品:CEK细胞、HB 611细胞、FLC-7细胞 H1184细胞系相关产品:OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞 CNE-2Z细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞 MBMEC细胞系相关产品:CNLMG-B5537SKIN细胞、alphaTC1 Clone 6细胞、UPCI:SCC90细胞 SK-MEL-24细胞系相关产品:HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞 MLOY4细胞系相关产品:PC615.3细胞、GM346细胞、GM00346细胞 C 643细胞系相关产品:NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞 MBVP细胞系相关产品:COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞 MUM2B细胞系相关产品:EL4细胞、H-187细胞、KP-N-RT-BM-1细胞 HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞 SK-CO-1细胞系相关产品:H-1734细胞、NCI-H1437细胞、CV 1细胞 GM03569细胞系相关产品:UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞 Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品:LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞 KYSE50细胞系相关产品:HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞 NL-20细胞系相关产品:RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞 P3-X63-Ag8细胞系相关产品:Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞 MFD-1细胞系相关产品:LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞 MDA-MB-134VI细胞系相关产品:OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞 PL-11细胞系相关产品:PA1细胞、RINm-5F细胞、B 95.8细胞 H1155细胞系相关产品:HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞 LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞 NPC-TW039细胞系相关产品:Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞 P3X63-Ag8.653细胞系相关产品:8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞 MCF7ADR细胞系相关产品:SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞 Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品:U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞 MDA-MB-436细胞系相关产品:CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞 IAR-20细胞系相关产品:LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞 SK-N-BE(2) Cell:人神经母细胞瘤细胞系 NCI-H596细胞系相关产品:MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞 H841细胞系相关产品:B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞 CCD-841CoN细胞系相关产品:HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞 GBCSD细胞系相关产品:Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞 PLA-802细胞系相关产品:BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞 B16 melanoma F10细胞系相关产品:NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞 CHOS细胞系相关产品:MCF 7细胞、HBE 135-E6E7细胞、TYKnu细胞 Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞 NCI-H1573细胞系相关产品:CCD19-Lu细胞、CNE1-LUC细胞、Scott细胞 GM00346细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞 Granta519细胞系相关产品:TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞 LS174细胞系相关产品:HIBEC细胞、Colon26细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞 "
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