"WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:详见相关文献介绍 SNU1细胞系相关产品:K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞 DMS-79细胞系相关产品:U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞 AR4-2J细胞系相关产品:Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞 NCI-H226细胞系相关产品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞、H820细胞、RA细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系 细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2传代 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 HT-1376细胞系相关产品:SUSM1细胞、NCI-H716细胞、KBM7细胞 BHT101细胞系相关产品:NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞 NT2/D1细胞系相关产品:H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞 NCIH1975细胞系相关产品:SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞 Vero 76细胞系相关产品:SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞 细胞生长特性:贴壁生长 WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 细胞形态特性:详见细胞说明书 Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞 WEHI 3B细胞系相关产品:Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞 A9 (Hamprecht)细胞系相关产品:HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞 NCI-H1792细胞系相关产品:MA 104细胞、COLO 678细胞、A-375SM细胞 KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞 Karpas-422细胞系相关产品:Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞 LC-1Sq细胞系相关产品:NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞 WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系 NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞 NUGC-3细胞系相关产品:H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞 Oregon J-111细胞系相关产品:RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞 MHCC-LM3细胞系相关产品:C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞 OCILY3细胞系相关产品:Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞 OCI/AML2细胞系相关产品:BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞 MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞 CCLP-1细胞系相关产品:NPC-TW-039细胞、CORL51细胞、A20细胞 HeLa-229细胞系相关产品:HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞 HeLa-229细胞系相关产品:HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞 H-EMC-SS细胞系相关产品:BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞 NCI-H87细胞系相关产品:7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞 NP69细胞系相关产品:H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞 Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品:ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞 MDBK (NBL-1)细胞系相关产品:H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞 OS-RC-2细胞系相关产品:NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞 HFL细胞系相关产品:HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞 Hs_578t细胞系相关产品:NOZC-1细胞、MILE SVEN 1细胞、NCIH1876细胞 Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品:NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞 HEYA8细胞系相关产品:Hs675T细胞、SJRH30细胞、FET细胞 AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞 Hs675T细胞系相关产品:A2780/CP70细胞、Tu-177细胞、624 MEL细胞 HONE1细胞系相关产品:T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞 HTR8细胞系相关产品:JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞 NCI-H2342细胞系相关产品:174xCEM.T2细胞、NCIH889细胞、hEEC细胞 KG1细胞系相关产品:BE2M17细胞、U-87MG ATCC细胞、Hs 766T细胞 ONS76细胞系相关产品:TCam 2细胞、He-La细胞、MG63细胞 SUM 159PT细胞系相关产品:GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞 EAC细胞系相关产品:U-373 MG细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞、Swiss-3T3细胞 NRK52E细胞系相关产品:HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞 HAVSMC细胞系相关产品:HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞 H-1417细胞系相关产品:CFPAC1细胞、NCIH1581细胞、KOSC-2 cl3-43细胞 LL/2细胞系相关产品:MDA-436细胞、TCCPAN2细胞、BEP2D细胞 Wien-133细胞系相关产品:NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞 H1882细胞系相关产品:HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞 AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞 Hs 940.T细胞系相关产品:CoC1细胞、TE10细胞、MEF (CF-1)细胞 BC3H1细胞系相关产品:T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞 Eca109细胞系相关产品:H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞 hOMF细胞系相关产品:Nthy ori 3.1细胞、JM-1细胞、OV 2008细胞 P3X63 Ag8细胞系相关产品:H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞 SNU-119细胞系相关产品:HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞 C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞 WM266-4 Cell:人黑素瘤细胞系 NOR10细胞系相关产品:NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞 OCM1A细胞系相关产品:686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞 UMUC1细胞系相关产品:HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞 OVCAR-5细胞系相关产品:R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞 MASMC细胞系相关产品:MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞 2PK3细胞系相关产品:NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞 TR-146细胞系相关产品:MDA-231细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、CHO细胞 OSK-1细胞系相关产品:REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞 Rin-M-5F细胞系相关产品:HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞 SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞 143B细胞系相关产品:JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞 MDCK (NBL-2)细胞系相关产品:KMS-26细胞、EL 4细胞、SW 1222细胞 "
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