RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系

"RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：肿瘤抑制基因： p５３ + [PubMed: ９２１４６０５] pRB + [PubMed: ９２１４６０５] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人乳头瘤病毒的１８(HPV-１８)进行转化，建立了RWPE-１ (ATCC CRL-１１６０９) 细胞株 [PubMed: ９２１４６０５]. 在三维Matrigel培养时，在雄激素作用下，RWPE-１细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: １１１７０１４２]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时，RWPE-１细胞也能形成腺胞[PubMed: １１３０４７２４] 并产生PSA。 来源于RWPE-１的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-２细胞株(ATCC CRL-１１６１０) [PubMed: ９２１４６０５] 和 RWPE２-W９９ (ATCC CRL-２８５３) 细胞株。 另外，用N--N-(MNU)处理RWPE-１，建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株。 它们是 WPE１-NA２２ (ATCC CRL-２８４９), WPE１-NB１４ (ATCC CRL-２８５０, WPE１-NB１１ (ATCC CRL-２８５１) 和 WPE１-NB２６ (ATCC CRL-２８５２) 细胞株。 据提供者报道，RWPE-１ 细胞株(ATCC CRL-１１６０９)经过检测，乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性。
HPBALL细胞系相关产品：HBL100细胞、FDCP1细胞、3T3-F442A细胞
NCI H295R细胞系相关产品：NCI-H1092细胞、RERFLCMS细胞、SUIT2细胞
OEC19细胞系相关产品：TE671细胞、PE/CA-PJ34细胞、Mia PACA 2细胞
MIO-M1细胞系相关产品：PL12细胞、OCI/AML2细胞、ZR7530细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３传代,２-３天传一代。
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GM-346细胞系相关产品：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
H1648细胞系相关产品：HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
MES-13细胞系相关产品：OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞
P3/NS-1细胞系相关产品：3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
DMS79细胞系相关产品：RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
细胞生长特性：贴壁生长
RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性：上皮细胞
REC-1细胞系相关产品：NCI-H-82细胞、MDA-MB 361细胞、SY5Y细胞
MARC145细胞系相关产品：FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
GTL16细胞系相关产品：NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
HUT 226细胞系相关产品：HCC-2185细胞、HCoEpiC细胞、CMT 167细胞
MDA PCa 2b细胞系相关产品：COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞
Mouse podocyte细胞系相关产品：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
SVHUC细胞系相关产品：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
NCI-H2291细胞系相关产品：NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
COLO 678细胞系相关产品：OVCA-432细胞、NCIH295R细胞、Panc-1-P细胞
Detroit-562细胞系相关产品：T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
MDCC MSB1细胞系相关产品：MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞
NB9细胞系相关产品：WM451细胞、A-9细胞、MPC11细胞
OCILY-10细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞
PC-3细胞系相关产品：Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
HuH-6细胞系相关产品：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
HuH-6细胞系相关产品：CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
A-9细胞系相关产品：LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞
B16-BL6细胞系相关产品：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品：OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
DC2.4细胞系相关产品：Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞
293AD细胞系相关产品：AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞
NCIH524细胞系相关产品：SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
LoMeT-ccRcc细胞系相关产品：RASMCs细胞、EoL-1细胞、OVCAR.5细胞
L-Wnt3A细胞系相关产品：Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
FL83B细胞系相关产品：H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
CAL27细胞系相关产品：MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
PZ-HPV-7细胞系相关产品：NCI-SNU-216细胞、174xCEM.T2细胞、HEK-293FT细胞
H-2073细胞系相关产品：Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞
C-4 I细胞系相关产品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞
COLO684细胞系相关产品：GP5d细胞、MDA134细胞、SNUC1细胞
Metastatic Variant-522细胞系相关产品：NCI-H2291细胞、GH 3细胞、Granta 519细胞
Clone 166细胞系相关产品：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
CHO/dhFr-细胞系相关产品：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
MMQ细胞系相关产品：Potorous tridactylus Kidney 2细胞、PANC0504细胞、EBTr (NBL-4)细胞
RD细胞系相关产品：MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
BC-021细胞系相关产品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
H-596细胞系相关产品：H-661细胞、CAL62细胞、Tb1Lu细胞
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
LI7细胞系相关产品：BxPC-3细胞、3T3 J2细胞、T173细胞
H-1435细胞系相关产品：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞
NCI-H920细胞系相关产品：HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
LM8细胞系相关产品：ECV 304细胞、PK-13细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞
RWPE-1 Cell:人正常前列腺上皮细胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
T84细胞系相关产品：A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
P3/NS-1细胞系相关产品：3LL细胞、SUM-102PT细胞、IPLB-Sf21细胞
H358细胞系相关产品：P3/NS1/1-Ag4.1细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、ACC-2细胞
NCI-H676细胞系相关产品：SKN-SH细胞、OCILY-3细胞、BC-027细胞
58F细胞系相关产品：BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
OVCA 432细胞系相关产品：YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞
CX-1细胞系相关产品：MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
MCF-12F细胞系相关产品：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、EL4细胞
"