"AsPC-1 Cell:人胰腺癌细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:该细胞来源于人胰腺癌裸鼠异种移植产生的癌性腹水,可以表达CEA,人胰腺相关抗原、人胰腺特异性抗原和黏蛋白。 MGC803细胞系相关产品:A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞 RF/6A细胞系相关产品:HT-29/CX-1细胞、RGM1细胞、LU65细胞 KMST6细胞系相关产品:MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞 BT 20细胞系相关产品:NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 AsPC-1 Cell:人胰腺癌细胞系 细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。 细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 GLRK 13细胞系相关产品:IB-RS-2细胞、RCC_7860细胞、67NR细胞 OLN 93细胞系相关产品:Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞 SNU520细胞系相关产品:H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞 MEL-526细胞系相关产品:Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞 COR L279细胞系相关产品:LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞 细胞生长特性:贴壁生长 AsPC-1 Cell:人胰腺癌细胞系 贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉! 细胞形态特性:上皮样 MXI细胞系相关产品:Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞 HOS-143B细胞系相关产品:DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞 MLA 144细胞系相关产品:ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞 CEL细胞系相关产品:FCCH1024细胞、U266S细胞、H-2342细胞 U87-MG细胞系相关产品:NCI-H1385细胞、C3H10T1-2细胞、C33-A细胞 HNE1细胞系相关产品:RINm5F细胞、TE-14细胞、AX-Mel细胞 EB-2细胞系相关产品:Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞 AsPC-1 Cell:人胰腺癌细胞系 WSUDLCL2细胞系相关产品:CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞 CHOS细胞系相关产品:MCF 7细胞、HBE 135-E6E7细胞、TYKnu细胞 HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞 HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞 Ramos-RA1细胞系相关产品:H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞 JG细胞系相关产品:SCC9细胞、High5细胞、MFE-296细胞 HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞 D283细胞系相关产品:SKMEL3细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、Det 562细胞 H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞 H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞 NCI-UMC-11细胞系相关产品:WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞 U-343MG细胞系相关产品:NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞 CCD 19Lu细胞系相关产品:TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞 DHBE细胞系相关产品:SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞 NCI H747细胞系相关产品:NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞 WRL 68细胞系相关产品:RAT2细胞、LIXC002细胞、U 138 MG细胞 B35细胞系相关产品:HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞 DMS-153细胞系相关产品:H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞 138 MG细胞系相关产品:HCC-9724细胞、A-204细胞、C2BBe1细胞 U87 MG细胞系相关产品:F56 [Human neoplasm]细胞、Chinese Hamster Lung细胞、NCI-H929细胞 MDCK supertube细胞系相关产品:MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞 SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞 MM134细胞系相关产品:H526细胞、SKOV-433细胞、KFB细胞 DU-4475细胞系相关产品:HCC1359细胞、CCD 841 CoTr细胞、HSKMC细胞 OK-WT细胞系相关产品:BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞 TU 686细胞系相关产品:NF639细胞、KOPN8细胞、N-Tera-2细胞 KYSE 410细胞系相关产品:ZR7530细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、786.O细胞 OCI/AML2细胞系相关产品:BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞 Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品:G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞 CFSC-8B细胞系相关产品:L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞 Lewis Lung细胞系相关产品:WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞 NRK 52E细胞系相关产品:OVCAR8细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞、GC-1细胞 HT 1080.T细胞系相关产品:SK-Hep1细胞、HANK细胞、HFL细胞 U-343-MG细胞系相关产品:OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞 Cor L51细胞系相关产品:NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞 HCC1008细胞系相关产品:HCC1588细胞、REC细胞、SNU-16细胞 A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞 CCD-33Co细胞系相关产品:HMC细胞、SKNEP-1细胞、SBC3细胞 WiDr-TC细胞系相关产品:Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、SUM-190PT细胞、WIL2 Secreting细胞 MSF细胞系相关产品:H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞 HOP92细胞系相关产品:MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞 HK-2 [Human kidney]细胞系相关产品:University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞 THP-1(ATCC)细胞系相关产品:J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞 AsPC-1 Cell:人胰腺癌细胞系 FLC7细胞系相关产品:GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞 Hs-27细胞系相关产品:SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞 BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞 MIA-Pa-Ca-2细胞系相关产品:451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞 CG-4细胞系相关产品:Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞 Ej138细胞系相关产品:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞 G 292 Clone A 141B1细胞系相关产品:T-HEECs细胞、COV504细胞、X63-AG 8.653细胞 624细胞系相关产品:MCMEC细胞、D10.G4.1细胞、CMT 64细胞 KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞 NG 108-15细胞系相关产品:GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞 COLO201细胞系相关产品:Duke University 4475细胞、BC-PAP细胞、Karpas422细胞 SK-N-BE-2c细胞系相关产品:H-1915细胞、6-10B细胞、SUM 52细胞 "
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