KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系

"KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：食管鳞癌；女性
BEAS-2B细胞系相关产品：PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞系相关产品：A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞
A427细胞系相关产品：CCD 841 CoN细胞、SW 954细胞、RH-35细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞
BIU-87/Adr细胞系相关产品：OVCA 432细胞、PF-382细胞、KYSE50细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
H295细胞系相关产品：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞
R 2 C细胞系相关产品：CCD-841-CoTr细胞、MDA-468细胞、HCEC-12细胞
细胞生长特性：贴壁
KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
T-T细胞系相关产品：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
KCL22细胞系相关产品：GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞
MDA231-LM2细胞系相关产品：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞
NCI-H498细胞系相关产品：RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
HTori 3细胞系相关产品：P3.653细胞、MEC1细胞、PGLH7细胞
TE-5细胞系相关产品：Leydig细胞、KU1919细胞、T.T细胞
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品：Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系
ECC 12细胞系相关产品：GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
CL11细胞系相关产品：HuH6细胞、P3-X63.Ag8.653细胞、HL7702细胞
PK15细胞系相关产品：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
HCCLM3细胞系相关产品：HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞
PaTu 8988 S细胞系相关产品：Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞
PC-9细胞系相关产品：CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞
SCC90细胞系相关产品：COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
H-EMC-SS细胞系相关产品：BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
HUT-226细胞系相关产品：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞
SK-N-MC细胞系相关产品：Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞
SK-N-BE细胞系相关产品：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
CEMO-1细胞系相关产品：HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞
L cell line细胞系相关产品：IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞
GM00637H细胞系相关产品：A101D细胞、SUDHL16细胞、IM-95细胞
COR-L23/P细胞系相关产品：RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞
H735细胞系相关产品：Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞
BALB/c 3T3 clone A31细胞系相关产品：SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
BALB/c 3T3 clone A31细胞系相关产品：SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
SB细胞系相关产品：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞系相关产品：Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
SU-DHL6细胞系相关产品：HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
SUDHL-8细胞系相关产品：SK-MEL-1细胞、OCI-Ly18细胞、LS123细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞
HCC0095细胞系相关产品：Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
LTEP-s细胞系相关产品：IEC6细胞、CCRF-CEM/S细胞、TR 146细胞
CCD-112CoN细胞系相关产品：PC-3M 2B4细胞、EHEB细胞、RPMI 8402细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
SNU886细胞系相关产品：Huh 7.5细胞、SNU-719细胞、Hu-P-T3细胞
CCD 966 SK细胞系相关产品：A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞
MCF 7细胞系相关产品：293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞
SHIN3细胞系相关产品：HO8910PM细胞、H187细胞、PC 61细胞
SF 295细胞系相关产品：MDA-MB 453细胞、SW-1116细胞、HuP-T3细胞
JOSK-M细胞系相关产品：SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
PCI-4M细胞系相关产品：hTERT RPE1细胞、52PE细胞、WM451Lu细胞
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞
H184A1细胞系相关产品：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞
High-5细胞系相关产品：NCIH446细胞、CL-40细胞、HCC-1359细胞
KYSE-520 Cell:人食管鳞癌细胞系
CTSC-3细胞系相关产品：HFF细胞、Nb2-11细胞、SU-DHL-5细胞
343 MG细胞系相关产品：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
U-343-MG细胞系相关产品：OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞
HCT 116细胞系相关产品：H1694细胞、MOLT-16细胞、Metastatic Variant-522细胞
H-1385细胞系相关产品：WIL2 Secreting细胞、H125细胞、Bat lung细胞
H-196细胞系相关产品：HCC941122细胞、NCIH510细胞、X63Ag8-653细胞
3T3J2细胞系相关产品：UMRC2细胞、CAL-39细胞、HEK-293-FT细胞
NS653细胞系相关产品：H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞
HO-8910PM细胞系相关产品：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
EVSAT细胞系相关产品：MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞
LS1034细胞系相关产品：NRK-52E细胞、P3HR1细胞、WM451细胞
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