"Mel-RM Cell:人黑色素瘤细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:黑色素瘤;神经节转移;男性 KYSE 70细胞系相关产品:REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞 SHI1细胞系相关产品:RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞 SCC15细胞系相关产品:H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞 WiDr/S细胞系相关产品:WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 Mel-RM Cell:人黑色素瘤细胞系 细胞培养相关问题总结:冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂;细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题;可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活;培养细胞时应使用5%或10%CO2?或根本没有影响?一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时,细胞培养时应使用10%CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时,则应使用5%CO2培养细胞。何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素?除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞 32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品:SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞 HTh 74细胞系相关产品:MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞 Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞 细胞生长特性:贴壁 Mel-RM Cell:人黑色素瘤细胞系 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 细胞形态特性:详见细胞说明书 RSMC细胞系相关产品:SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞 UMNSAH-DF 1细胞系相关产品:EOL1细胞、SK.MEL.2细胞、H2052_MM细胞 TKB1细胞系相关产品:Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞 NCIH2122细胞系相关产品:LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞 hs 68细胞系相关产品:MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞 RGC-6细胞系相关产品:RPMI7666细胞、RKO-AS45-1细胞、RCC10 RGB细胞 NFHIOSE-29细胞系相关产品:NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞 Mel-RM Cell:人黑色素瘤细胞系 210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品:C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞 NCI-H1781细胞系相关产品:253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞 Colon-38细胞系相关产品:CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞 P 815细胞系相关产品:SPCA1细胞、SNU354细胞、EU-3细胞 P-815细胞系相关产品:P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞 MFE296细胞系相关产品:SU-DHL1细胞、CCD-841CoTr细胞、HBL1细胞 VP229细胞系相关产品:SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞 LX-2细胞系相关产品:MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞 MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞 MOLM-13细胞系相关产品:NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞 PT-K75细胞系相关产品:KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞 HSAS3细胞系相关产品:PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞 MNNG细胞系相关产品:I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞 P388.D1细胞系相关产品:SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞 M14-MEL细胞系相关产品:MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞 DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞 M-14细胞系相关产品:SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞 Kit 225-K6细胞系相关产品:3T3-F442A细胞、PIEC细胞、SK-MEL-3细胞 SK.MEL.28细胞系相关产品:H-1770细胞、U-251细胞、Z138细胞 MDA-MB-415细胞系相关产品:NCI.H23细胞、QSG7701细胞、H-1930细胞 NCI-SNU-878细胞系相关产品:VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞 H-157细胞系相关产品:U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞 BEL 7402细胞系相关产品:HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞 ASH3细胞系相关产品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞 Tca8113细胞系相关产品:Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞 HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞 A253细胞系相关产品:RPE-hTERT细胞、ME16C细胞、LED-WiDr细胞 HEK293-EBNA1细胞系相关产品:16HBE细胞、M21细胞、IPECJ2细胞 MeT 5A细胞系相关产品:SW1783细胞、IPI-2I细胞、Panc 02.03细胞 RCC-JF细胞系相关产品:HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞 SNU16细胞系相关产品:CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞 HKF细胞系相关产品:H-157细胞、OV1063细胞、NCIH520细胞 Bovine Turbinate细胞系相关产品:MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞 HLE细胞系相关产品:PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞 Malme3M细胞系相关产品:NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞 SPCA1细胞系相关产品:Hep-G2细胞、DHL-5细胞、CCD 966 SK细胞 Hs 729.T细胞系相关产品:H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞 32Dcl3细胞系相关产品:NIH3T3细胞、A 2780 CP细胞、WPMY-1细胞 NCIH460细胞系相关产品:Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞 Panc 8.13细胞系相关产品:BC-3H-1细胞、TOV-112D细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞 MFE 296细胞系相关产品:SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞 SW579细胞系相关产品:Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞 EST50细胞系相关产品:CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞 Mel-RM Cell:人黑色素瘤细胞系 MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞 V79-GalK1细胞系相关产品:GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞 HA细胞系相关产品:HOS/MNNG细胞、UCW 100细胞、SCC VII细胞 ME16C细胞系相关产品:NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞 HEC-1A细胞系相关产品:Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞 HT1080细胞系相关产品:PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞 Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞 JS1细胞系相关产品:786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞 EBNA-293细胞系相关产品:SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞 U-373 MG细胞系相关产品:L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞 Hs 636 T细胞系相关产品:SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞 ND7/23细胞系相关产品:BA/F3细胞、SUSM-1细胞、NIH-3T3-L1细胞 "
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