"ECC-1 Cell:人子宫内膜腺癌细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:内膜腺癌;女性 Walker 256细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞 Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞 OVCAR10细胞系相关产品:U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞 SK-BR-3细胞系相关产品:KMS11细胞、CAMA-1细胞、OVCAR 432细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 ECC-1 Cell:人子宫内膜腺癌细胞系 如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 NB19-RIKEN细胞系相关产品:MODE-K细胞、NCI-H2342细胞、IPEC-J2细胞 HCC-2108细胞系相关产品:Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞 MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品:Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞 CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞 CCC-HSF-1细胞系相关产品:McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞 细胞生长特性:贴壁 ECC-1 Cell:人子宫内膜腺癌细胞系 贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞! 细胞形态特性:详见细胞说明书 CHP126细胞系相关产品:HC-11细胞、HCC2935细胞、LS174细胞 Hu-P-T3细胞系相关产品:OCM1细胞、NCI-H28细胞、526mel细胞 GM04154细胞系相关产品:NE-1细胞、PC9细胞、CEL细胞 Hs-852-T细胞系相关产品:U-343MG细胞、H-295R细胞、ACC2细胞 MLTC-1细胞系相关产品:MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞 HS 1.Tes细胞系相关产品:MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞 L Wnt-3A细胞系相关产品:HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞 ECC-1 Cell:人子宫内膜腺癌细胞系 HCC-1937细胞系相关产品:RBMEC细胞、OE21细胞、MDAMB330细胞 M20 [Human melanoma]细胞系相关产品:WM115细胞、MeT5A细胞、SUM 159细胞 OVCA8细胞系相关产品:GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞 GS9L细胞系相关产品:Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞 3396细胞系相关产品:MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞 ReNcell CX细胞系相关产品:HM06.A1细胞、U251MG细胞、P3-x63-Ag8 653细胞 LWnt-3A细胞系相关产品:A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞 KYSE 450细胞系相关产品:Med 283细胞、WM239细胞、SNU354细胞 SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞 SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞 Granta-519细胞系相关产品:RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞 NCI-H345细胞系相关产品:MOVAS-1细胞、MAC1细胞、K-1735细胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞系相关产品:A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞 T47-D细胞系相关产品:L 1210细胞、EFM-19细胞、CAL 33细胞 PIGI细胞系相关产品:GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞 KP-N-YN细胞系相关产品:SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞 Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品:TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞 Sup T-1细胞系相关产品:NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞 SNU-5细胞系相关产品:SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞 B16F10细胞系相关产品:CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞系相关产品:HT 1376.T细胞、OVCAR 433细胞、PANC 1005细胞 MFM-223细胞系相关产品:SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞 RMS 1598细胞系相关产品:PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞 MC/CAR细胞系相关产品:A-2058细胞、A 72细胞、WEHI 3B细胞 OVCAR.8细胞系相关产品:H-446细胞、HCM细胞、IPLB-Sf21AE细胞 C8161细胞系相关产品:H1238细胞、H196细胞、FO [Mouse myeloma]细胞 CCD 841 CoTr细胞系相关产品:COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞 NCIH1666细胞系相关产品:MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞 MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞 OSRC2细胞系相关产品:GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞 H2195细胞系相关产品:NCI-SNU-449细胞、COLO679细胞、NCI H716细胞 NCIH2110细胞系相关产品:CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞 ROS17/28细胞系相关产品:Immortalized Human Hepatocytes细胞、MC57G细胞、IGROV-1细胞 Anip-973细胞系相关产品:D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞 Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞系相关产品:MC/CAR细胞、HEM-L细胞、HuH6细胞 Panc4.03细胞系相关产品:RMG-1细胞、EB2细胞、Melanoma 14细胞 TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞 AsPC-1细胞系相关产品:MCF12A细胞、HCT-8/V细胞、LSECs细胞 OCM-1A细胞系相关产品:A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞 B-95-8细胞系相关产品:L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞 H220细胞系相关产品:H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞 CMT-167细胞系相关产品:SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞 ECC-1 Cell:人子宫内膜腺癌细胞系 JTC-39细胞系相关产品:H460细胞、OS-RC-2细胞、MOLT-4细胞 RT112细胞系相关产品:RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞 WC00079细胞系相关产品:A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞 SU-DHL-10细胞系相关产品:BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞 C2C12细胞系相关产品:OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞 CAL12T细胞系相关产品:L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞 CCC-ESF-1细胞系相关产品:H1781细胞、Namalwa细胞、MB231细胞 EAhy926细胞系相关产品:Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞 HSC5细胞系相关产品:SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞 WIL2-S细胞系相关产品:COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞 C2BBe 1细胞系相关产品:KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞 SK HEP-1细胞系相关产品:HEK-293-H细胞、Hi-five细胞、SNU638细胞 "
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