KMBC Cell:人胆管癌细胞系

"KMBC Cell:人胆管癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胆管癌；男性
RCM1细胞系相关产品：J-82细胞、RMS 1598细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞
SUPT-1细胞系相关产品：RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
NALM-6细胞系相关产品：RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KMBC Cell:人胆管癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC1599细胞系相关产品：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品：NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
L-132细胞系相关产品：CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
细胞生长特性：贴壁
KMBC Cell:人胆管癌细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-H446细胞系相关产品：WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
RN细胞系相关产品：SCC-4细胞、4T1细胞、NCI-H1963细胞
16HBE140细胞系相关产品：NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
Calu3细胞系相关产品：PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
KP-N-RT-BM细胞系相关产品：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞
Human Kidney-2细胞系相关产品：NCI-H1975细胞、B16-F10细胞、H-1876细胞
MOLM-16细胞系相关产品：McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
KMBC Cell:人胆管癌细胞系
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞
NIHOVCAR3细胞系相关产品：FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞
LPC-H12细胞系相关产品：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞
L(TK-)细胞系相关产品：MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
TGW细胞系相关产品：Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞
C3H/10T1/2 clone 8细胞系相关产品：TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
OLN-93细胞系相关产品：SRA 01/04细胞、C3H/10T1/2细胞、NS1/1-Ag4.1细胞
Panc 03.27细胞系相关产品：Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
NMCG1细胞系相关产品：HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞
SK-ES1细胞系相关产品：HS-5细胞、PSN1细胞、PFSK1细胞
SW1463细胞系相关产品：H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品：Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
P-3J细胞系相关产品：TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞
NCTC-3960细胞系相关产品：JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
F9细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
SW 1783细胞系相关产品：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
PANC-28细胞系相关产品：CHAGOK1细胞、NCI-H510A细胞、H-EMC-SS细胞
SUD4细胞系相关产品：HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
MDCC MSB1细胞系相关产品：MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞
PA I细胞系相关产品：GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
HSAS3细胞系相关产品：PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞
Hs611T细胞系相关产品：B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞
DSL-6A/C1细胞系相关产品：OVCAR-420细胞、MDA175细胞、A427细胞
H-1693细胞系相关产品：3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
P3.653细胞系相关产品：Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
Jurkat细胞系相关产品：Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞
8402细胞系相关产品：VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品：VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
HSC-1细胞系相关产品：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
P30/Ohkubo细胞系相关产品：OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞
U-266细胞系相关产品：EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
FBHE细胞系相关产品：NCI-H1781细胞、A2780/CP细胞、MHCC97L细胞
RBMVEC细胞系相关产品：DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞
OCI-Ly7细胞系相关产品：NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞
L cells细胞系相关产品：HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
L cells细胞系相关产品：HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
NCI-H1876细胞系相关产品：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
KMBC Cell:人胆管癌细胞系
Raji细胞系相关产品：VAESBJ细胞、Hs737T细胞、HGC-27细胞
Immortal Pig Intestinal-2I细胞系相关产品：CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
C3H10T1/2细胞系相关产品：NCIH1573细胞、PCI-04B细胞、HCEpiC细胞
746T细胞系相关产品：MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
JVM-3细胞系相关产品：KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
DH82细胞系相关产品：IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
SNU-C2A细胞系相关产品：AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品：Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
AML-2细胞系相关产品：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞
TE354.T细胞系相关产品：S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
MRC9细胞系相关产品：HLEB-3细胞、NCI-H226细胞、NCIH510细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、FL-83B细胞、NCTC-929细胞
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