KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系

"KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：膀胱癌；男性
SNU398细胞系相关产品：G 401细胞、SKUT-1细胞、SK-N-BE(2)-C细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
Mhh-Call 2细胞系相关产品：GP2-293细胞、RBVEC细胞、J 774A.1细胞
SW 756细胞系相关产品：G422细胞、RBL-1细胞、CCD 966SK细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培养液需在２-８℃避光保存;含血清完全培养液在２-８℃保存，并在２周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１-２分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用７５%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CNE细胞系相关产品：JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
HuH1细胞系相关产品：NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞
HEL-1细胞系相关产品：SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞
NCI-H1404细胞系相关产品：THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞
NCI-SNU-878细胞系相关产品：VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
细胞生长特性：贴壁
KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气高压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
PK15细胞系相关产品：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
HRA19细胞系相关产品：UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
GM03569D细胞系相关产品：MSTO-211H细胞、MDA MB 175 VII细胞、HL-60 clone15细胞
UO-31细胞系相关产品：Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞
HL60细胞系相关产品：MT-3 [Human leukocytes]细胞、Farage细胞、MDA MB 436细胞
MDCK supertube细胞系相关产品：MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞
KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系
HFT8810细胞系相关产品：MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞
Michigan Cancer Foundation-12A细胞系相关产品：NBL-12细胞、HSC/mHSC细胞、CAL27细胞
SW 780细胞系相关产品：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞
H-2591细胞系相关产品：HTori-3细胞、A549细胞、CCRF CEM细胞
NCI-H2141细胞系相关产品：KTA-7细胞、Ca9-22细胞、BIC-1细胞
PIG1细胞系相关产品：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞
MDA1386细胞系相关产品：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞
NCI-H1563细胞系相关产品：HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
NCI-H1563细胞系相关产品：HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
Mino细胞系相关产品：EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞
JROECL 21细胞系相关产品：KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞
U937细胞系相关产品：Kasumi-6细胞、Rat Lung-65细胞、SF 126细胞
HSC6细胞系相关产品：HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
BCAP37细胞系相关产品：HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞
Spodoptera frugiperda clone 9细胞系相关产品：IPLB-Sf21细胞、VP 267细胞、KBM5细胞
THPI细胞系相关产品：SK-N-BE(2C)细胞、NBL-12细胞、HS940细胞
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
Hs274T细胞系相关产品：NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
M07e细胞系相关产品：BS-C-1细胞、SW 1271细胞、LTEPsm细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
McCoy B细胞系相关产品：SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞
A875细胞系相关产品：SNU182细胞、U2932细胞、H820细胞
H-35 Reuber细胞系相关产品：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞
LuCL4细胞系相关产品：CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞
SU-86-86细胞系相关产品：HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
HDLM2细胞系相关产品：HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
MV411细胞系相关产品：SCC7细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、PFSK细胞
LS-174T细胞系相关产品：H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
HMEC-1细胞系相关产品：LICCF细胞、5637细胞、APRE-19细胞
SNU-387细胞系相关产品：H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
SBC-5细胞系相关产品：SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
JeKo 1细胞系相关产品：HPAF-2细胞、TE-8细胞、hOMF细胞
Caco-2 BBe细胞系相关产品：RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
NCI-H2081细胞系相关产品：NCI-H102细胞、Mouse podocyte细胞、Evsa-T细胞
210RCY3-Ag1.2.3细胞系相关产品：C32 [Human melanoma]细胞、QSG-7701细胞、NCIH650细胞
MDCKII细胞系相关产品：NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞
OKT3细胞系相关产品：TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
F442-A细胞系相关产品：MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞
Hs 695.T细胞系相关产品：HSC6细胞、IBRS-2细胞、CHL-11细胞
Rin-M-5F细胞系相关产品：HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞
DH-82细胞系相关产品：PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞
OCI-Ly03细胞系相关产品：L929细胞、A-253细胞、MC/9细胞
KU-19-19 Cell:人膀胱癌细胞系
CP-70细胞系相关产品：MHCC97-H细胞、SNU-5细胞、UMC-11细胞
LC-1/sq细胞系相关产品：Panc 10.05细胞、Scott细胞、EC-GI细胞
NCI-HUT-69细胞系相关产品：SKUT1细胞、Karpas 299细胞、H596细胞
MDA MB 134VI细胞系相关产品：KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品：ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
C42细胞系相关产品：LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
TE12细胞系相关产品：UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
KYSE-270细胞系相关产品：MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
293E细胞系相关产品：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞
MG-HU-3细胞系相关产品：TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞
253J细胞系相关产品：GM3569细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞、RT4P细胞
HCASMC细胞系相关产品：NR-8383细胞、NCIH1355细胞、SF 126细胞
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