"LTEP-a2 Cell:人肺腺癌细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:肺腺癌;女性 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞系相关产品:HFB细胞、PL-5细胞、MCF 7B细胞 RIN-m5F细胞系相关产品:NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞 GM2132细胞系相关产品:CCD 841 CoTr细胞、H2347细胞、WEHI-3细胞 GM06141B细胞系相关产品:MGH-U1 (EJ)细胞、SN12-PM6细胞、H-719细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 LTEP-a2 Cell:人肺腺癌细胞系 如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 BRL-3A细胞系相关产品:Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞 Tu212细胞系相关产品:FOX-NY细胞、RT4P细胞、H-1436细胞 CHL/IU细胞系相关产品:NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞 K422细胞系相关产品:N2a细胞、DHL-8细胞、Chang Cells细胞 FT-293细胞系相关产品:B104 [Rat neuroblastoma]细胞、ARH-77细胞、NPA87-1细胞 细胞生长特性:贴壁 LTEP-a2 Cell:人肺腺癌细胞系 贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞! 细胞形态特性:详见细胞说明书 MPC-83细胞系相关产品:PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞 SKNEP1细胞系相关产品:PG-LH7细胞、BV173细胞、HT3细胞 HUC-1细胞系相关产品:NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞 MPASMC细胞系相关产品:Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞 MX-1细胞系相关产品:HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞 HNE2细胞系相关产品:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞 Be-Wo细胞系相关产品:BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞 LTEP-a2 Cell:人肺腺癌细胞系 293AD细胞系相关产品:AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞 H1404细胞系相关产品:He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞 RKOAS451细胞系相关产品:T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞 BV-173细胞系相关产品:Hs 940.T细胞、Mv1.Lu细胞、H676细胞 A9 (Hamprecht)细胞系相关产品:HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞 P116细胞系相关产品:MH-22a细胞、DMS 114细胞、CHP 126细胞 THLE-3细胞系相关产品:Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞 rRTEC细胞系相关产品:H596细胞、NCI-H1105细胞、MCF7ADR细胞 P3-X63.Ag8.653细胞系相关产品:MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞 MN-60细胞系相关产品:Wien133细胞、H-838细胞、HCC1599细胞 THLE-3细胞系相关产品:Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞 RPMI8226细胞系相关产品:TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞 HN 4细胞系相关产品:NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞 LS-411N细胞系相关产品:N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞 PG-4(S+L-)细胞系相关产品:F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞 SW1990细胞系相关产品:SNU1040细胞、CACO2细胞、C-4I细胞 COLO.205细胞系相关产品:PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞 CHL/IU细胞系相关产品:NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞 PNT1A细胞系相关产品:RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞 NIT-1细胞系相关产品:NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞 OCI-AML2细胞系相关产品:COLO320DM细胞、Panc02.03细胞、HNE1细胞 HEK/EBNA细胞系相关产品:K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞 MM6细胞系相关产品:Kit225细胞、Rabbit Kidney 13细胞、C3A细胞 JeKo-1细胞系相关产品:UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞 SW1783细胞系相关产品:HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞 SNU739细胞系相关产品:CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞 MPC-83细胞系相关产品:PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞 SUM-52细胞系相关产品:AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞 SUM190细胞系相关产品:SW 780细胞、JURKAT E-61细胞、SCC15细胞 RPMI 1788细胞系相关产品:Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞 Bowes melanoma cells细胞系相关产品:HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞 Wistar Institute, Susan Hayflick细胞系相关产品:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞 D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞 U373MG细胞系相关产品:TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞 C-Lu-65细胞系相关产品:CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞 SW403细胞系相关产品:V-79细胞、no-11细胞、6T-CEM细胞 RAEC细胞系相关产品:HCC2279细胞、NCIH2122细胞、HM06.A1细胞 BXPC3细胞系相关产品:ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞 LL/2 (LLC1)细胞系相关产品:HeLa229细胞、ROS 17/2.8细胞、LAN6细胞 WEHI-3B细胞系相关产品:Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞 HL7702细胞系相关产品:HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞 Glioma-261细胞系相关产品:BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品:GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞 LTEP-a2 Cell:人肺腺癌细胞系 159PT细胞系相关产品:NCI-H2122细胞、SuDHL 8细胞、CCD-1112sk细胞 ACC-M细胞系相关产品:MCF10-A细胞、NFS60细胞、HN13细胞 LAN5细胞系相关产品:SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞 Hs 839.T细胞系相关产品:NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞 NCIH838细胞系相关产品:MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞 Sf21细胞系相关产品:U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞 ZR-75-1细胞系相关产品:H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞 HCC 70细胞系相关产品:Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞 U-2 OS细胞系相关产品:CL 1-0细胞、HSAS3细胞、MMQ细胞 J774 A.1细胞系相关产品:SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞 GM2219C细胞系相关产品:AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞 HFLS细胞系相关产品:MPC11细胞、Panc05.04细胞、Panc813细胞 "
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