"B6Tert-1 Cell:人滋养层细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:滋养层;HGNC-TRET永生;女性 FHL124细胞系相关产品:GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞 Reuber H-35细胞系相关产品:STO细胞、Hs940-T细胞、PL 5细胞 CNE-1细胞系相关产品:HPBALL细胞、SUSM1细胞、IA-LM细胞 NCIH1651细胞系相关产品:KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 B6Tert-1 Cell:人滋养层细胞系 细胞冻存基本方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×10(6)/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 SW-1463细胞系相关产品:HO1-N-1细胞、MCF.7细胞、BEAS2B细胞 COLO-394细胞系相关产品:H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞 NCIH520细胞系相关产品:SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞 MDA-MB-468-RED细胞系相关产品:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞 OCI-AML4细胞系相关产品:HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞 细胞生长特性:贴壁 B6Tert-1 Cell:人滋养层细胞系 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 细胞形态特性:详见细胞说明书 H2052细胞系相关产品:K-562细胞、P560细胞、L cells (TK-)细胞 CAL27细胞系相关产品:MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞 P3.NS-1/1.Ag4.1细胞系相关产品:BJAB细胞、SKUT1细胞、B16F1细胞 EoL-1-cell细胞系相关产品:BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞 U87细胞系相关产品:PANC1005细胞、ECC10细胞、RCM1细胞 MDA-MB-415细胞系相关产品:NCI.H23细胞、QSG7701细胞、H-1930细胞 PK 15细胞系相关产品:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞 B6Tert-1 Cell:人滋养层细胞系 ARO 81-1细胞系相关产品:FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞 TE8细胞系相关产品:RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞 Lu-99A细胞系相关产品:P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞 NCIADR.RES细胞系相关产品:SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞 3T3-Swiss细胞系相关产品:SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞 HNE2细胞系相关产品:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞 HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞 RKN细胞系相关产品:Tu177细胞、OE33细胞、ECV304细胞 NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞 NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞 OCI/AML-2细胞系相关产品:HCC94细胞、SKNFI细胞、HC11细胞 CNE细胞系相关产品:JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞 HMC-1细胞系相关产品:ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞 SkMel31细胞系相关产品:CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞 293-EBNA1细胞系相关产品:NS-1-Ag4-1细胞、RAW264.7细胞、Blotchy fibroblast-11细胞 Porcine Kidney-15细胞系相关产品:PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞 H748细胞系相关产品:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞 NCIH1666细胞系相关产品:MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞 HEL92.1.7细胞系相关产品:MLMEC细胞、MDA157细胞、GM05372细胞 Panc 4.03细胞系相关产品:WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞 SR-786细胞系相关产品:OCI/AML-4细胞、EFM-192B细胞、SK-RC-52细胞 Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞 H-1355细胞系相关产品:CCC-HIE-2细胞、BERH-2细胞、UCLA NPA871细胞 OVCAR 4细胞系相关产品:TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞 Hs445细胞系相关产品:SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞 NCI-H165细胞系相关产品:H69C细胞、MC-4细胞、HPF细胞 H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞 AtT20细胞系相关产品:U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞 OCI/AML-4细胞系相关产品:IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞 PT67细胞系相关产品:CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞 SNU-251细胞系相关产品:NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞 YD-38细胞系相关产品:H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞 UPCI-SCC-090细胞系相关产品:U20-S细胞、R3/1细胞、OVMANA细胞 COV-362细胞系相关产品:BAEC细胞、MKN45细胞、PLB 985细胞 Tn-5B1-4细胞系相关产品:OSC-19细胞、MNNG-HOS细胞、HL-60 Clone 15细胞 CALU1细胞系相关产品:LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞 D-341 Med细胞系相关产品:OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞 HS766T细胞系相关产品:CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞 MCF-7ADR细胞系相关产品:Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞 OVCAR 433细胞系相关产品:COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞 UCW 100细胞系相关产品:RPTEC/TERT 1细胞、SW839细胞、TCam 2细胞 NCIH716细胞系相关产品:GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞 mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞 B6Tert-1 Cell:人滋养层细胞系 HD-LM-2细胞系相关产品:EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞 HCC0095细胞系相关产品:Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞 RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞 HCC-1588细胞系相关产品:H-2087细胞、ARH77细胞、KU 19-19细胞 TE3A细胞系相关产品:U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞 NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞 HCC2157细胞系相关产品:IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞 Hs274T细胞系相关产品:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞 95C细胞系相关产品:BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞 NIH:OVCAR-10细胞系相关产品:RPTEC TERT1细胞、HONE-1细胞、MDA MB 175 VII细胞 DMS 273细胞系相关产品:AN-3细胞、OCI-Ly7细胞、Hs940-T细胞 Vero C1008细胞系相关产品:COLO 206F细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞 "
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