"PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:喉鳞癌;淋巴结转移;男性
MSTO-211细胞系相关产品:HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
HEL 92.1.7细胞系相关产品:MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
UPCI:SCC90细胞系相关产品:Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
AU 565细胞系相关产品:Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BNL CL.2细胞系相关产品:TF1细胞、JURKAT E-6.1细胞、Colo-206F细胞
B-104细胞系相关产品:COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
NMC-G1细胞系相关产品:MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞
SK UT 1细胞系相关产品:SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞
Sci-1细胞系相关产品:Anip-973细胞、EC-9706细胞、ECC 10细胞
细胞生长特性:贴壁
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
NCI-H2135细胞系相关产品:DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
Leukemia L1210细胞系相关产品:Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
NCIH841细胞系相关产品:C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
KLN-205细胞系相关产品:RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
DI-TNC1细胞系相关产品:SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞
HEP-3B2细胞系相关产品:CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
Hi-5细胞系相关产品:HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
293EBNA细胞系相关产品:GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
HEK-293H细胞系相关产品:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
Panc 10.05细胞系相关产品:U373-MG细胞、CMT-93细胞、SNUC2A细胞
NCIH187细胞系相关产品:J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞
PAEC细胞系相关产品:HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
RPMI no 8226细胞系相关产品:NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
KM.12细胞系相关产品:HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
143TK-细胞系相关产品:BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞
143TK-细胞系相关产品:BE(2)C细胞、SK Hep1细胞、WRL-68细胞
G-402细胞系相关产品:FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
118 MG细胞系相关产品:HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
WI 38细胞系相关产品:GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
QGP 1细胞系相关产品:H-35细胞、LTEPsm细胞、CATH.a细胞
SUSM-1细胞系相关产品:NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
BSC1细胞系相关产品:Granta-519细胞、SNU-119细胞、H69/P细胞
PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
SEG-1细胞系相关产品:H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
NKT细胞系相关产品:MASMC细胞、Tca8113细胞、SKMEL5细胞
NCI-H1417细胞系相关产品:KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
U-343细胞系相关产品:P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
OV2008细胞系相关产品:NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
H929细胞系相关产品:639 V细胞、VK-2/E6E7细胞、NOK细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品:M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
EC-GI细胞系相关产品:MV-3细胞、PK13细胞、293-GP细胞
GM00637B细胞系相关产品:Neukoplast细胞、L-M(TK-)细胞、alphaTC1 Clone 6细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品:NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
HEM细胞系相关产品:SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞
JHH-2细胞系相关产品:MRC-9细胞、LP1细胞、IM95细胞
C518细胞系相关产品:MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品:MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
LOU-NH-91细胞系相关产品:MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞
NCTC-3960细胞系相关产品:JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
SW-403细胞系相关产品:TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞
MGHU3细胞系相关产品:MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞
Ect1/E6E7细胞系相关产品:NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞
K562/ADP细胞系相关产品:SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
Anip 973细胞系相关产品:OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
TF-1a细胞系相关产品:Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞
Anip[973]细胞系相关产品:B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
PA I细胞系相关产品:GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
OVCA432细胞系相关产品:KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞
PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
WEHI 3细胞系相关产品:NCI-H292细胞、Hs27F细胞、Clone 15 HL-60细胞
BT-20细胞系相关产品:Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞
SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品:3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
HCC1954 BL细胞系相关产品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞
no-11细胞系相关产品:MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞
Panc-327细胞系相关产品:HCEC-12细胞、SN12C细胞、SNU-C2B细胞
Mac-1细胞系相关产品:U87细胞、SNU761细胞、3396细胞
BS-C-1细胞系相关产品:U87-MG细胞、RCC-4细胞、H-1693细胞
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
MRC-V细胞系相关产品:Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
A875细胞系相关产品:SNU182细胞、REC细胞、HPASMC细胞
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关键字: PCI-04B Cell:人喉鳞癌细胞系
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