"CBRH-7919 Cell:大鼠肝癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HPAF2细胞系相关产品:EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
QG-56细胞系相关产品:SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
NCI-H810细胞系相关产品:ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CBRH-7919 Cell:大鼠肝癌细胞系
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HGE细胞系相关产品:Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞
MOLP-8细胞系相关产品:Hs 742.T细胞、HSC-4细胞、SNU475细胞
EOMA细胞系相关产品:P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞
526-mel细胞系相关产品:MMAc-Serum Free细胞、LLC-MK2细胞、JROECL 19细胞
WM239A细胞系相关产品:PC-3M-IE8细胞、OVCAR420细胞、TCMK1细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
CBRH-7919 Cell:大鼠肝癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
细胞形态特性:详见细胞说明书
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
LU65细胞系相关产品:130 T细胞、H2405细胞、SW 1573细胞
SVG p12细胞系相关产品:NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
REC细胞系相关产品:JROECL21细胞、SUD6细胞、C4-2B细胞
SW-480细胞系相关产品:NCI-H78细胞、MSB-1细胞、BALL-1细胞
3T3-Swiss细胞系相关产品:SK Mel 24细胞、LIPF155C细胞、DMS-79细胞
RMG-I细胞系相关产品:HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞
CBRH-7919 Cell:大鼠肝癌细胞系
NCI-157细胞系相关产品:KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
UMUC-14细胞系相关产品:HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
H250细胞系相关产品:VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞
N-87细胞系相关产品:108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
DMS 153细胞系相关产品:Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞
T_T_细胞系相关产品:BN-CL2细胞、NCIH82细胞、LP1细胞
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品:OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
G-402细胞系相关产品:FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品:PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
JM-Jurkat细胞系相关产品:PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品:IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
NCI-H1092细胞系相关产品:RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞系相关产品:AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞
293细胞系相关产品:NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞
SW 13细胞系相关产品:CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞
Capan-1细胞系相关产品:COLO-1细胞、SNU-520细胞、RPMI1846细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品:OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
SW.620细胞系相关产品:GM-215细胞、MCCAR细胞、SK-NMC细胞
NCIH1618细胞系相关产品:CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
GLC-82细胞系相关产品:C2C12细胞、NCI-H292细胞、1E8-H细胞
CHO cell clone K1细胞系相关产品:HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
A-704细胞系相关产品:CEM C7细胞、HCV29细胞、NCI-H676B细胞
TNC-1B12B4细胞系相关产品:Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞
PC-3M细胞系相关产品:Murine Lung Epithelial-12细胞、NCIH128细胞、8226/S细胞
MFE 280细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品:SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
HEK 293-F细胞系相关产品:TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
CD 18细胞系相关产品:KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
Hs 578T细胞系相关产品:SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞
THLE-2细胞系相关产品:TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
UMNSAH-DF1细胞系相关产品:PC10细胞、BE(2)-M17细胞、CAL-12T细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品:HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
TW 01细胞系相关产品:A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
COLO320 DM细胞系相关产品:RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞
HPDLF细胞系相关产品:HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞
Hs 688(A).T细胞系相关产品:SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
MDCK-2细胞系相关产品:Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
GP293细胞系相关产品:KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
MDA-MB157细胞系相关产品:hUC-MSC细胞、CZ-1细胞、SUM-102细胞
CG4细胞系相关产品:PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞
OV1/P细胞系相关产品:CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
LK2细胞系相关产品:H3396细胞、PaTu 8988 S细胞、PC-3M 2B4细胞
CBRH-7919 Cell:大鼠肝癌细胞系
TOG细胞系相关产品:Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞
NCI-H889细胞系相关产品:P3 88 D1细胞、MCF.10A细胞、BCAP37细胞
IAR 20细胞系相关产品:NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞
NCI-H711细胞系相关产品:P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
P-3J细胞系相关产品:TE14细胞、NCI-H1944细胞、VMCUB-1细胞
CF Pac1细胞系相关产品:bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
He La细胞系相关产品:C81-61细胞、EST50细胞、M210B4细胞
SU.86细胞系相关产品:TCam-2细胞、IGROV1细胞、HPAF-I细胞
Tu-177细胞系相关产品:MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
TSU-Pr1细胞系相关产品:H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
NCI-SNU-601细胞系相关产品:U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞
Hep G2细胞系相关产品:SKLU1细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、LAPC-4细胞
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