"HAC-84 Cell:人肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
SK-N-BE2C细胞系相关产品：MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
COLO 320HSR细胞系相关产品：A 72细胞、OV90细胞、HHL-5细胞
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HAC-84 Cell:人肺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CHO/dhFr-细胞系相关产品：MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
RGM1细胞系相关产品：C1R细胞、HT-29细胞、SKMel-28细胞
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
GM0637细胞系相关产品：SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞
MHH-CALL-2细胞系相关产品：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
HAC-84 Cell:人肺癌细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
WEHI 164细胞系相关产品：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
U-937细胞系相关产品：MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
NL-20细胞系相关产品：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞
H-1437细胞系相关产品：H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
CAL 85-1细胞系相关产品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
H2107细胞系相关产品：38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
HAC-84 Cell:人肺癌细胞系
Be-Wo细胞系相关产品：BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞
D341Med细胞系相关产品：NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞
RPMI8402细胞系相关产品：C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞
JKT-1细胞系相关产品：HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
SP2细胞系相关产品：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞
HFLS细胞系相关产品：MPC11细胞、HCC-9204细胞、HEM细胞
KNS81细胞系相关产品：3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞
Wistar Institute-38细胞系相关产品：PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
B6Tert-1细胞系相关产品：CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞
B6Tert-1细胞系相关产品：CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞
PNT-1A细胞系相关产品：SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
LLC PK1细胞系相关产品：U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
WM266-4细胞系相关产品：MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
ACC3细胞系相关产品：SU.86细胞、Detroit562细胞、OC-316细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
NTERA2-cloneD1细胞系相关产品：GL-261细胞、MB49细胞、SUNE 1细胞
HuCC-T1细胞系相关产品：HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
IOSE-Van细胞系相关产品：VM Cub 1细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞、HMO6细胞
JCA-1细胞系相关产品：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
Kuramochi细胞系相关产品：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
LTEP-s细胞系相关产品：IEC6细胞、CCRF-CEM/S细胞、TR 146细胞
GM03320D细胞系相关产品：TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
ZYM-SVEC01细胞系相关产品：EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞
Ramos-2G6-4C10细胞系相关产品：BT 549细胞、PANC0327细胞、COS7细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
Jurkat-E6细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney-21细胞、WM-451Lu细胞、NIH 3T6细胞
LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
K562/ADR细胞系相关产品：LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
SKN-AS细胞系相关产品：NCI-H1238细胞、Glioma-261细胞、Earle's L cells细胞
COLO-738细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞
NCI-H2126细胞系相关产品：NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
H1048细胞系相关产品：IGROV1细胞、HT55细胞、NL20细胞
GM00215细胞系相关产品：OS-RC-2细胞、NCIH524细胞、OCI AML2细胞
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
293E细胞系相关产品：INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞
NCI-H295细胞系相关产品：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
SKOV-433细胞系相关产品：H1703细胞、Hs 729.T细胞、MC-26细胞
OV1/P细胞系相关产品：CA46细胞、MDAMB435细胞、CCD18细胞
DU145细胞系相关产品：RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
MAntle cell VERona-1细胞系相关产品：CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞系相关产品：A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞
HPAF II细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
HAC-84 Cell:人肺癌细胞系
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
201T细胞系相关产品：Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
C33A细胞系相关产品：NCIH1770细胞、HCC2157细胞、Chinese Hamster Ovary细胞
ROS 17/2.8细胞系相关产品：HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞
Tadarida brasiliensis 1 lung细胞系相关产品：JCA-1细胞、SCC15细胞、P30/OHK细胞
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
HT 1080细胞系相关产品：KG1A细胞、SKNBE(2)细胞、RMG-1细胞
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
HCC9724细胞系相关产品：BIU87细胞、MRAEC细胞、T-47D细胞
Hs729细胞系相关产品：Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、U-118MG细胞、WERIRb1细胞
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