"NCI-H774 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
MDA435细胞系相关产品：NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品：8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
H1184细胞系相关产品：OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞
TE7细胞系相关产品：NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H774 Cell:人小细胞肺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：每周换液２次。
细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度(最高不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SU.86.86细胞系相关产品：D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞
B16/F1细胞系相关产品：H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
CORL279细胞系相关产品：MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞
T 24细胞系相关产品：MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞
细胞生长特性：悬浮生长
NCI-H774 Cell:人小细胞肺癌细胞系
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
细胞形态特性：详见细胞说明书
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞
MMAc-Serum Free细胞系相关产品：OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
SW48细胞系相关产品：NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
KNS62细胞系相关产品：LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
MESSA-DX5细胞系相关产品：GLC-15细胞、PLA801D细胞、OCI-AML2细胞
MONO-MAC 6细胞系相关产品：H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
BT.549细胞系相关产品：H1755细胞、KU19-19细胞、DV90细胞
NCI-H774 Cell:人小细胞肺癌细胞系
P31 FUJ细胞系相关产品：MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞
PE CA PJ34细胞系相关产品：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
L-6TG细胞系相关产品：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
LS-123细胞系相关产品：Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
WERI-Rb 1细胞系相关产品：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
AN3-CA细胞系相关产品：UCLA-SO-M20细胞、GM16136细胞、SNK-1细胞
OKT3细胞系相关产品：TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
OKT3细胞系相关产品：TNC-1B12B4细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞、343 MG细胞
OCILY-3细胞系相关产品：Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞
OKa-C-1细胞系相关产品：RPMI-1788细胞、C33细胞、N-87细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
HGBEC细胞系相关产品：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞
SkChA1细胞系相关产品：REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
JM1细胞系相关产品：MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
NCI.H522细胞系相关产品：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞
KYSE70细胞系相关产品：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞系相关产品：SHEE细胞、NCI-H660细胞、NS-1-Ag4-1细胞
J774 A1细胞系相关产品：Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞
SN12PM6细胞系相关产品：COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
NCI-H2198细胞系相关产品：Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞
16HBEo-细胞系相关产品：NCIH3255细胞、MH7A细胞、aNK细胞
Hs-274-T细胞系相关产品：GI-1细胞、HeLa S-3细胞、Pfeiffer细胞
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞
HeLa.S3细胞系相关产品：ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞
TE-32细胞系相关产品：P3-Jiyoye细胞、hTERT-RPE细胞、EVSAT细胞
EnCa1细胞系相关产品：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞
EAhy 926细胞系相关产品：SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
NCIH460细胞系相关产品：Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
H1770细胞系相关产品：H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞
VK2细胞系相关产品：COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品：293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
H-2347细胞系相关产品：Anglne细胞、WM-239细胞、TCC Sup细胞
CWR22-R1细胞系相关产品：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
CAL-12T细胞系相关产品：BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞
OPM2细胞系相关产品：KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
NPC-TW-039细胞系相关产品：MDAMB231细胞、OV433细胞、LWnt3A细胞
TE14细胞系相关产品：C3H/10T1/2 clone 8细胞、OVCAR10细胞、7404细胞
AtT-20细胞系相关产品：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞
NCI-H774 Cell:人小细胞肺癌细胞系
ABE8.1/2细胞系相关产品：Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
Panc813细胞系相关产品：Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
NRK clone 52E细胞系相关产品：PBL细胞、ARO81细胞、NIH:OVCAR-5细胞
RWPE-2细胞系相关产品：C 643细胞、SF-539细胞、NT2D1细胞
RTMC细胞系相关产品：PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
CTV-1细胞系相关产品：P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
L-cell细胞系相关产品：MC116细胞、TW-039细胞、NCI-H1755细胞
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
UM-UC3细胞系相关产品：HEC1A细胞、H1299细胞、HD-LM-2细胞
KYSE 510细胞系相关产品：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞
T8细胞系相关产品：Lu-65细胞、RGM1细胞、Panc 08.13细胞
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