"A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
UMC-11细胞系相关产品：Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞
RPMI-7951细胞系相关产品：HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
VP267细胞系相关产品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、COV-434细胞、H2029细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品：Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
TE-3A细胞系相关产品：COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
ECV-304细胞系相关产品：National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
MCM细胞系相关产品：P-36细胞、C3H 10T1/2细胞、MFE280细胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞系相关产品：Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、201T细胞、Hs695T细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
A-549 Cell:人肺癌细胞系
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NSH细胞系相关产品：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
Leukemic 1210细胞系相关产品：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
Ca761细胞系相关产品：NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
MDAMB453细胞系相关产品：MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞
16HBE140细胞系相关产品：NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
NCI-H660细胞系相关产品：SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞
CNE细胞系相关产品：JB6Cl30细胞、SP-2细胞、MC26细胞
A-549 Cell:人肺癌细胞系
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
RC-4B/C细胞系相关产品：SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
RIN14B细胞系相关产品：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
HCC-1428细胞系相关产品：BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
COV 504细胞系相关产品：HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
TE6细胞系相关产品：MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞
NCIH1836细胞系相关产品：WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
NCIH1836细胞系相关产品：WM-451Lu细胞、HUT-125细胞、OVCAR 433细胞
BC-027细胞系相关产品：MOVAS细胞、SW 620细胞、CT-26 WT细胞
H-II-E-C3细胞系相关产品：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞
L M (TK-)细胞系相关产品：UT-7细胞、FRTL-5细胞、58F细胞
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
WM 451-Lu细胞系相关产品：HCC2185细胞、H-716细胞、MKN 45细胞
HT-115细胞系相关产品：32D.3细胞、HSMC细胞、A-172 MG细胞
mREC细胞系相关产品：SKNBE(2c)细胞、16-HBE14o细胞、LLC-PK-1细胞
MDAMB134细胞系相关产品：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
HS-695T细胞系相关产品：HCV29细胞、SCC 25细胞、L M (TK-)细胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞系相关产品：QGY7701细胞、CNE-2细胞、PK (15)细胞
M 1细胞系相关产品：32D.cl3细胞、NCIH187细胞、639 V细胞
COLO829细胞系相关产品：HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
Hs606T细胞系相关产品：FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
BIU-87/Adr细胞系相关产品：OVCA 432细胞、PF-382细胞、KYSE50细胞
MRCV细胞系相关产品：NCI-H524细胞、BEP2D细胞、D-283细胞
LS123细胞系相关产品：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
COLO 738细胞系相关产品：T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
AR4-2J细胞系相关产品：Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、HNEpC细胞、HS0578T细胞
ARO81细胞系相关产品：SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞
WEHI 231细胞系相关产品：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞
Daudi细胞系相关产品：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
SLMT1细胞系相关产品：L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
SUM 159PT细胞系相关产品：GM02132细胞、TE-5细胞、P3-X63Ag8.653细胞
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
RSC 96细胞系相关产品：Ej138细胞、SKMEL-31细胞、IEC 18细胞
H7721细胞系相关产品：OCI-Ly 18细胞、NCIH2073细胞、PY8119细胞
BCPAP细胞系相关产品：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品：MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
A-549 Cell:人肺癌细胞系
SIRC细胞系相关产品：YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
COLO829细胞系相关产品：HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
SCC 25细胞系相关产品：NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞
M210B4细胞系相关产品：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞
MDAMB435S细胞系相关产品：Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
H1648细胞系相关产品：HFSF细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、HBE细胞
Mono Mac 6细胞系相关产品：CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
MB39细胞系相关产品：Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
HIT T15细胞系相关产品：SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
H2405细胞系相关产品：BALL-1细胞、MSB-1细胞、PCI-4M细胞
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