"Ha Fe Cell:人羊膜细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：详见相关文献介绍
CL-11细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞
NCI-H2066细胞系相关产品：Panc_08_13细胞、Hs606T细胞、3T3细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品：MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
BEL-7405细胞系相关产品：H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Ha Fe Cell:人羊膜细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
QSG7701细胞系相关产品：SKUT-1细胞、CCRF-SB细胞、PGBE1细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品：CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
HMEC-1细胞系相关产品：LICCF细胞、5637细胞、APRE-19细胞
SK RC 20细胞系相关产品：OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
Ha Fe Cell:人羊膜细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
NL20细胞系相关产品：RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞
SW-756细胞系相关产品：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
RM1细胞系相关产品：NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞
MOLP-2细胞系相关产品：NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
Vero from pool #76细胞系相关产品：TM-3细胞、DoTc2 4510细胞、HCE-2 [50.B1]细胞
Ha Fe Cell:人羊膜细胞系
TE-5细胞系相关产品：Leydig细胞、KU1919细胞、T.T细胞
BC-3H-1细胞系相关产品：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞
A375.S2细胞系相关产品：DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞系相关产品：GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞
H1651细胞系相关产品：OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞
HSC2细胞系相关产品：HUT125细胞、HEC251细胞、NKM-1细胞
KYSE 520细胞系相关产品：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
SK MEL 28细胞系相关产品：Fetal Human Colon细胞、NP69细胞、HREC细胞
OCI/AML4细胞系相关产品：SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
CHO-ori细胞系相关产品：FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
B16 melanoma细胞系相关产品：As-PC1细胞、End1/E6E7细胞、H889细胞
NCIH196细胞系相关产品：YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
Cloudman M3细胞系相关产品：Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞
LS-174T细胞系相关产品：H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
FRO 81-2细胞系相关产品：hTERT-RPE1细胞、Ect1/E6E7细胞、IMCD3细胞
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
OSKM-1细胞系相关产品：CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
Potorous tridactylus Kidney 1细胞系相关产品：Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞
HSC1细胞系相关产品：PC 61 5.3细胞、HLMVEC细胞、HT1376细胞
Det. 562细胞系相关产品：H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞
P3J.HR1K细胞系相关产品：H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞
SF-295细胞系相关产品：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞
PK 15细胞系相关产品：MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
VeroC1008细胞系相关产品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
L-02细胞系相关产品：H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞
PC3-M细胞系相关产品：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
CG-4细胞系相关产品：Panc 4.03细胞、K562/ADP细胞、H647ell细胞
D-283 Med细胞系相关产品：KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
H1435细胞系相关产品：Panc5.04细胞、NCIH1395细胞、190PT细胞
T84细胞系相关产品：A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
BIC细胞系相关产品：NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞
HF-91细胞系相关产品：TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
PECAPJ34细胞系相关产品：BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
MPC-83细胞系相关产品：PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞
526mel细胞系相关产品：MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
KTC1细胞系相关产品：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
MOLP2细胞系相关产品：MDA231细胞、Panc2.03细胞、PTK1细胞
Ha Fe Cell:人羊膜细胞系
RPE1-hTERT细胞系相关产品：H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
EB-2细胞系相关产品：Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
H-727细胞系相关产品：293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
CCD33Co细胞系相关产品：T-47D细胞、U118-MG细胞、Leukemia L1210细胞
H2135细胞系相关产品：HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞
H2066细胞系相关产品：H889细胞、T-84细胞、PLA802细胞
IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
C-33-A细胞系相关产品：PVEC细胞、293c18细胞、NCI-H2107细胞
NCIH2342细胞系相关产品：RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞
MDA231-LM2-4175细胞系相关产品：CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
Med 341细胞系相关产品：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞
P31-FUJ细胞系相关产品：801-D细胞、CNE-2Z细胞、MC-26细胞
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