"ONS-76 Cell:人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
K1735细胞系相关产品:C3H 10T1/2细胞、Hs 742.T细胞、LI7细胞
HSAEC1-KT细胞系相关产品:SW-403细胞、Duke University 4475细胞、H-1623细胞
KGN细胞系相关产品:SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
ONS-76 Cell:人脑髓母细胞瘤细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HSF细胞系相关产品:C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞系相关产品:SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
A-101D细胞系相关产品:OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
细胞生长特性:贴壁生长
ONS-76 Cell:人脑髓母细胞瘤细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:上皮样
SK RC 20细胞系相关产品:OV1-P细胞、3T3-J2细胞、P3X63Ag8细胞
NS20-Y细胞系相关产品:F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
BL-6细胞系相关产品:CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞
D283MED细胞系相关产品:Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
Hs 840.T细胞系相关产品:SUIT-2细胞、HCC-2279细胞、Human Liver-7702细胞
HS940细胞系相关产品:Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞
TCam-2细胞系相关产品:SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞
ONS-76 Cell:人脑髓母细胞瘤细胞系
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
MCF.7细胞系相关产品:SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
JCA-1细胞系相关产品:NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
CoCL3细胞系相关产品:H1355细胞、H2228细胞、T-ALL1细胞
KG1A细胞系相关产品:Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞
Ramos (RA 1)细胞系相关产品:hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
H774细胞系相关产品:IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
MDA134细胞系相关产品:RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
EC9706细胞系相关产品:EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞
HMEL细胞系相关产品:Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
HFE-145细胞系相关产品:VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞
KG-1细胞系相关产品:SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
SVG p12细胞系相关产品:NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
HCC366细胞系相关产品:L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞
LuCL4细胞系相关产品:CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞系相关产品:NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
WM266-4细胞系相关产品:MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
HBZY-1细胞系相关产品:OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞
NCIH322细胞系相关产品:SW-1116细胞、H-865细胞、Henrietta Lacks cells细胞
P3-x63-Ag8 653细胞系相关产品:H23细胞、NCIH2126细胞、MV3细胞
Line 522细胞系相关产品:H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
PaTu 8988s细胞系相关产品:22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞
Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞
DU4475细胞系相关产品:LNCaP细胞、MT-4细胞、KTC1细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
TE5细胞系相关产品:MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞
WM 239-A细胞系相关产品:BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
CHP126细胞系相关产品:HC-11细胞、HCC2935细胞、LS174细胞
H28细胞系相关产品:H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
EB2细胞系相关产品:CX1细胞、786O细胞、NCIH524细胞
RPTC细胞系相关产品:MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
AtT-20细胞系相关产品:H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞
Hs 729细胞系相关产品:SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞
TM-3细胞系相关产品:LS174细胞、3T3-A31细胞、746T细胞
HMCB细胞系相关产品:Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MDCKII-WT细胞、NPC-TW 01细胞
NS-I/1细胞系相关产品:3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
MeWo细胞系相关产品:OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞
DHL10细胞系相关产品:H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞
H2291细胞系相关产品:RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞
GLC82细胞系相关产品:NCTC 929细胞、Panc5.04细胞、TE-8细胞
ONS-76 Cell:人脑髓母细胞瘤细胞系
OV3121细胞系相关产品:BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞
SU-DHL-6细胞系相关产品:SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞
CCD-1112sk细胞系相关产品:Renal Carcinoma细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞、H727细胞
L23/P细胞系相关产品:ETCC007细胞、Mink细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞
A375-MEL细胞系相关产品:Hs 746.T细胞、SKLU-1细胞、Porcine Kidney-15细胞
RT-BM-1细胞系相关产品:HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞
TMD-8细胞系相关产品:293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞
6-10B细胞系相关产品:SK-ChA-1细胞、OVCA8细胞、SU-86-86细胞
BT 20细胞系相关产品:NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
HeLa S-3细胞系相关产品:HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞系相关产品:EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞
CAL 12细胞系相关产品:PTK2细胞、L-540细胞、DHL-6细胞
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