"SNU-761 Cell:人肝癌细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HEC-251细胞系相关产品:GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
LC2/Ad细胞系相关产品:RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
KYSE 520细胞系相关产品:H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
rHSC-99细胞系相关产品:624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SNU-761 Cell:人肝癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
138MG细胞系相关产品:TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞
UMUC14细胞系相关产品:Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
HuPT3细胞系相关产品:LU165细胞、624-mel细胞、COLO-738细胞
CL1细胞系相关产品:BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
NK92细胞系相关产品:HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
SNU-761 Cell:人肝癌细胞系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞形态特性:详见细胞说明书
RAW2647细胞系相关产品:P30/OHK细胞、0V-1063细胞、SNU520细胞
AMJ2-C8细胞系相关产品:ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞
GM02132细胞系相关产品:SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
JC细胞系相关产品:NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞
EoL-1细胞系相关产品:MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
KMH2细胞系相关产品:SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
MOLT16细胞系相关产品:J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞
SNU-761 Cell:人肝癌细胞系
GM02219D细胞系相关产品:RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
Panc_08_13细胞系相关产品:CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
NCI-H1793细胞系相关产品:Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
MCF-10 Attached细胞系相关产品:NCIH929细胞、E6-1细胞、RL952细胞
IM95细胞系相关产品:CORL279细胞、Nakata-1细胞、Panc_04_03细胞
NRK49F细胞系相关产品:SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞
Hep2细胞系相关产品:H-660细胞、hFOB1.19细胞、LICR-LON-HN6-R细胞
RBL 1细胞系相关产品:DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
MDCK2细胞系相关产品:MDA-MB-134细胞、Jurkat77细胞、SPC-A-1细胞
P3.NS-1/1.Ag4.1细胞系相关产品:BJAB细胞、SKUT1细胞、B16F1细胞
CEM-CCRF细胞系相关产品:PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞
SNB19细胞系相关产品:TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞
CAL 51细胞系相关产品:Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞
COLO 206F细胞系相关产品:PLA 802细胞、CCD 966 SK细胞、Hi-five细胞
MOLT3细胞系相关产品:NCI-H660细胞、P3 (Jiyoye)细胞、293 c18细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
H292细胞系相关产品:SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
L929(NCTC)细胞系相关产品:C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
J774A1细胞系相关产品:H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞
CAL 51细胞系相关产品:Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞
Jurkat-FHCRC细胞系相关产品:SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
HS5细胞系相关产品:huH 1细胞、PLB985细胞、COLO829细胞
HeLa-229细胞系相关产品:HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
SCC-4细胞系相关产品:NCIH1048细胞、TE7细胞、SUM-149PT细胞
MOLP2细胞系相关产品:MDA231细胞、Panc2.03细胞、PTK1细胞
MDAMB231细胞系相关产品:MUTZ-1细胞、PANC-08-13细胞、H128细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
HPC-Y5细胞系相关产品:GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞
Reh细胞系相关产品:CA922细胞、BT-474细胞、FHs74 Int细胞
H-2122细胞系相关产品:SF126细胞、MDA231-LM2-4175细胞、TF1细胞
MA104细胞系相关产品:ONS-76细胞、MOLM16细胞、HSC1细胞
UCH1细胞系相关产品:HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
MV-522细胞系相关产品:SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞
MDAMB175VII细胞系相关产品:HCV-29细胞、CT-26细胞、WM451细胞
U-373MG ATCC细胞系相关产品:IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
NALM-6-M1细胞系相关产品:HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞
Wayne State University-Head and Neck 13细胞系相关产品:NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
COS7细胞系相关产品:BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
K562细胞系相关产品:SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
Hs-578T细胞系相关产品:MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞
GL-261细胞系相关产品:Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
SNU119细胞系相关产品:MDA1386细胞、MUTZ-3细胞、CL1-0细胞
BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
SNU-761 Cell:人肝癌细胞系
U251-MG细胞系相关产品:Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
A-20细胞系相关产品:EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
PSN1细胞系相关产品:SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
A2780CP细胞系相关产品:SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞
High5细胞系相关产品:C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
TSCC1细胞系相关产品:SW-756细胞、M4e细胞、HuP-T4细胞
H865细胞系相关产品:HEK 293FT细胞、B16F0细胞、R-1059-D细胞
8402细胞系相关产品:VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
tdott细胞系相关产品:PANC0813细胞、PC-3M-2B4细胞、U-2932细胞
VeroC1008细胞系相关产品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、CEMO-1细胞、EST81细胞
HVSMC细胞系相关产品:OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞
L cell line细胞系相关产品:IBMF-7细胞、H-1563细胞、MCF 10A细胞
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