"KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:详见相关文献介绍
SUD6细胞系相关产品:NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞
P3.653细胞系相关产品:Ect1/E6E7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、H446细胞
TNC-1B12B4细胞系相关产品:Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞
RH35细胞系相关产品:Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
IGROV 1细胞系相关产品:HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
3T3F442A细胞系相关产品:Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
PSN1细胞系相关产品:SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
SW-620细胞系相关产品:COR-L51细胞、CHO/dhFr-细胞、SW1088细胞
细胞生长特性:贴壁生长
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:详见细胞说明书
CHL-IU细胞系相关产品:KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
HL60细胞系相关产品:MT-3 [Human leukocytes]细胞、Farage细胞、MDA MB 436细胞
MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
A 172细胞系相关产品:A427细胞、BEAS2B细胞、Tissue Culture-1细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品:OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
P3/X63-Ag8细胞系相关产品:MHCC 97细胞、MOVAS细胞、HCC-366细胞
NCI-H1694细胞系相关产品:H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
GC-1细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞
MDA MB 453细胞系相关产品:M-G63细胞、T47D:A细胞、C32-mel细胞
Hs840_T细胞系相关产品:LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
H-1299细胞系相关产品:T98G细胞、P116细胞、MFE 296细胞
ES2细胞系相关产品:OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞
WEHI 164细胞系相关产品:HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
HFLS-OA细胞系相关产品:HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
BTI-TN5B1-4细胞系相关产品:HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
Hepatoma-22细胞系相关产品:NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞
SW1783细胞系相关产品:HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞
PaTu-8988s细胞系相关产品:8305-C细胞、EBC-1/original细胞、SCC154细胞
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
U343MG细胞系相关产品:JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品:Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品:COLO-320细胞、GM0637细胞、CNE1-LUC细胞
WRL68细胞系相关产品:D-283细胞、H-2107细胞、LC-2/ad细胞
M619细胞系相关产品:H498细胞、PC-10细胞、UM-RC-2细胞
Eca 109细胞系相关产品:HO8910/PM细胞、PC 12细胞、SNU869细胞
NCI-H322细胞系相关产品:CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
NCI-H322细胞系相关产品:CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
VMM5A细胞系相关产品:CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
GM02132细胞系相关产品:SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
HS 445T细胞系相关产品:MDA.MB.435细胞、PK15细胞、L-cells细胞
H-1819细胞系相关产品:5637细胞、SKNDZ细胞、OCI-Ly3细胞
NCTC 929细胞系相关产品:Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
P3X63 Ag8细胞系相关产品:H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
HIT.T15细胞系相关产品:M3 Clone M-3细胞、H7721细胞、Capan 1细胞
NTera2/D1细胞系相关产品:PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞
Hs-611-T细胞系相关产品:HCC-202细胞、H-1618细胞、Sol8细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
KHYG-1细胞系相关产品:Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
ECC-1细胞系相关产品:3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
H69/P细胞系相关产品:Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
HCC-9724细胞系相关产品:LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞
GM05372E细胞系相关产品:SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
LS 174 T细胞系相关产品:WILL2细胞、HepG2-luc细胞、MPP89细胞
QBC939细胞系相关产品:HRA-19细胞、TE9细胞、C518细胞
Panc10.05细胞系相关产品:MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
Panc10.05细胞系相关产品:MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
OCI-Ly01细胞系相关产品:Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
HEK-293F细胞系相关产品:Jurkat E6细胞、FTC-133细胞、COLO 320DM细胞
KMB-17 Cell:人二倍体细胞系
SU86.86细胞系相关产品:NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞
BE2C细胞系相关产品:H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
HT55细胞系相关产品:SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
M-1 myeloid leukemia细胞系相关产品:NCI H69细胞、H69/P细胞、RAT2细胞
NK-92MI细胞系相关产品:SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
TOV-21G细胞系相关产品:H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
H 9细胞系相关产品:Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、BE(2)C细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞
M21细胞系相关产品:NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
Hs746T细胞系相关产品:CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
MDAMB175细胞系相关产品:FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞
CP-70细胞系相关产品:MHCC97-H细胞、M-14细胞、NPA'87细胞
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