"A-9 Cell:小鼠皮下结缔组织细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:皮下结缔组织;自发永生;雄性;C3H/An
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
K7M2 wt细胞系相关产品:Caov-4细胞、J-774A.1细胞、Jeko1细胞
OCIAML2细胞系相关产品:DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
NRK52E细胞系相关产品:HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A-9 Cell:小鼠皮下结缔组织细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SUDHL-6细胞系相关产品:MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞
L-132细胞系相关产品:CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
SCH细胞系相关产品:SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞
P3-X63Ag8.653细胞系相关产品:PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞
PA I细胞系相关产品:GM00637H细胞、P3J.HR1K细胞、EU-2细胞
细胞生长特性:贴壁
A-9 Cell:小鼠皮下结缔组织细胞系
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞形态特性:详见细胞说明书
32Dc3细胞系相关产品:L-M(TK-)细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞、BE(2)M-17细胞
GM01232E细胞系相关产品:P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
Hs611T细胞系相关产品:B16-F0细胞、MFD-1细胞、NCIH1385细胞
HEC-151细胞系相关产品:HepG2-luc细胞、H358细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞
RL95细胞系相关产品:MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞
NCIH2196细胞系相关产品:HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
H596细胞系相关产品:GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞
A-9 Cell:小鼠皮下结缔组织细胞系
HCC9204细胞系相关产品:BEL 7402细胞、RKO_AS45细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞
AtT 20细胞系相关产品:HN13细胞、A549/ATCC细胞、MCF7/WT细胞
OVCAR.8细胞系相关产品:H-446细胞、HCM细胞、IPLB-Sf21AE细胞
LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
MCMEC细胞系相关产品:IB-RS2细胞、HUT28细胞、PC-3/M细胞
SW-756细胞系相关产品:CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
HSC5细胞系相关产品:SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
ZYM-SVEC01细胞系相关产品:EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞
DoTc2细胞系相关产品:Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞
DoTc2细胞系相关产品:Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞
MA-782细胞系相关产品:NKT细胞、AR41P细胞、UCLA SO M14细胞
Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品:G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
H4IIE细胞系相关产品:H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
HEK-293H细胞系相关产品:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
Mc Coy细胞系相关产品:FHs74 Int细胞、526细胞、KASUMI1细胞
MESSADX5细胞系相关产品:MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
VMCUB1细胞系相关产品:H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞
PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
BT细胞系相关产品:OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞
CHG-5细胞系相关产品:SW1573细胞、A375.S2细胞、CL 1-5细胞
ARO81-1细胞系相关产品:IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞
NCIH2227细胞系相关产品:OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
H322T细胞系相关产品:H676B细胞、MV-522细胞、U138MG细胞
DHL-5细胞系相关产品:KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞
SUDHL6细胞系相关产品:H841细胞、RAOEC细胞、ATN-1细胞
A2780-CP细胞系相关产品:Hs 578.T细胞、NG10815细胞、KM-H2细胞
RAOEC细胞系相关产品:KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞
WPE-int细胞系相关产品:HCC-2108细胞、DMS-53细胞、BIC细胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞系相关产品:B10BR细胞、C-33A细胞、HuH 6细胞
NCI-H-295细胞系相关产品:KM932细胞、LN-229细胞、NCCIT细胞
MCF.10A细胞系相关产品:HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品:SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
HEK293-H细胞系相关产品:SKNMC细胞、OCI AML4细胞、U87MG细胞
P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品:SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
UMRC2细胞系相关产品:32D/cl3细胞、Malme3M细胞、HBZY-1细胞
SNU620细胞系相关产品:NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品:SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞
N1S1细胞系相关产品:NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
IOSE80细胞系相关产品:NCI-H69C细胞、Jurkat E6-1细胞、MGECs细胞
REC 1细胞系相关产品:HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞
TE32细胞系相关产品:NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞
TE-85 clone 5细胞系相关产品:TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
FC33细胞系相关产品:MonoMac1细胞、HEK-A细胞、AM38细胞
A-9 Cell:小鼠皮下结缔组织细胞系
SKNSH细胞系相关产品:OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞
N87细胞系相关产品:HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
RCK8细胞系相关产品:HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞
H-28细胞系相关产品:NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
ECGI10细胞系相关产品:CG4细胞、BDCM细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞
HIEC-6细胞系相关产品:GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞
TE-5细胞系相关产品:Leydig细胞、KU1919细胞、T.T细胞
RAW 264.7细胞系相关产品:NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品:PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞
IFRS1细胞系相关产品:SNU-423细胞、GM06141细胞、TE13细胞
BAEC细胞系相关产品:C28/I2细胞、H295细胞、LK2细胞
A375S2细胞系相关产品:H1341细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、SCC 25细胞
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