"LLC-PK1 Cell:猪肾细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：肾；自发永生；Hampshire
Scott细胞系相关产品：GOS3细胞、SCC 4细胞、SW1116细胞
HEC-1A细胞系相关产品：Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
MDA-MB-175细胞系相关产品：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞
HO1-N1细胞系相关产品：SU-DHL-8细胞、Dakiki细胞、YH-13细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
LLC-PK1 Cell:猪肾细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NPA87-1细胞系相关产品：SUM 52PE细胞、Y3细胞、HT 1376细胞
CALU1细胞系相关产品：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品：GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
细胞生长特性：贴壁
LLC-PK1 Cell:猪肾细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
细胞形态特性：详见细胞说明书
RMa-bm细胞系相关产品：CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
KAT-5细胞系相关产品：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞
CCD-112 CoN细胞系相关产品：266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞
H1944细胞系相关产品：Giant Cell Tumor细胞、HFF1细胞、8505C细胞
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
Madison lung细胞系相关产品：WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
LLC-PK1 Cell:猪肾细胞系
SNU-620细胞系相关产品：DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞
P3X63 AG8-653细胞系相关产品：T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞
Leydig细胞系相关产品：CTSC-3细胞、BPH-1细胞、MC3T3-L1细胞
373MG细胞系相关产品：624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
CZ-1细胞系相关产品：ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞
NCIH1395细胞系相关产品：C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
SK-N-FI细胞系相关产品：Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
SNU878细胞系相关产品：L cell细胞、CMECs细胞、A-875细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞
293细胞系相关产品：NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞
NKM1细胞系相关产品：ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞
HEK-293细胞系相关产品：Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞
HCC1833细胞系相关产品：HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
TM-4细胞系相关产品：OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞
PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
CEMx721.174.T2细胞系相关产品：Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
BCPAP细胞系相关产品：NCCIT细胞、X63-AG 8.653细胞、COLO-357细胞
HVSMC细胞系相关产品：OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞
SW 900细胞系相关产品：H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞
B16-BL6细胞系相关产品：C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
LS-174T细胞系相关产品：H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
NCI-HUT-596细胞系相关产品：675T细胞、A 253细胞、CWR22Rv1细胞
T 24细胞系相关产品：MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞
CCD1095Sk细胞系相关产品：NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
GM-3573细胞系相关产品：CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
KALS-1细胞系相关产品：RA 1细胞、SUDHL1细胞、OVCA433细胞
ATC241细胞系相关产品：HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
SW-948细胞系相关产品：SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
GM03190A细胞系相关产品：A-253细胞、Fu97细胞、TEC细胞
Panc-3_27细胞系相关产品：WiDr细胞、SUIT 2细胞、PC3M-2B4细胞
HT 115细胞系相关产品：SBC5细胞、H2171细胞、KYSE520细胞
HEEpiC细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
VERO76细胞系相关产品：AN3CA细胞、SCC090细胞、CAKI.1细胞
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞
MAVER-1细胞系相关产品：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
Be-Wo细胞系相关产品：BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞
CMT 64细胞系相关产品：TGBC11T细胞、M20 [Human melanoma]细胞、NEC8细胞
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
H1793细胞系相关产品：TGW-nu-1细胞、SVEC 4-10细胞、SK Mel 1细胞
JJN-3细胞系相关产品：HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
Huh-7细胞系相关产品：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
LLC-PK1 Cell:猪肾细胞系
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞
SNU668细胞系相关产品：Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞
NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞
MTC-TT细胞系相关产品：UMC11细胞、MeWo细胞、HBVSMC细胞
HCT-FET细胞系相关产品：KYSE 50细胞、H3255细胞、HCT-8细胞
SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞
SACC-83细胞系相关产品：LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞
LC1sq细胞系相关产品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、RPMI-8226S细胞、RenCa细胞
ROS1728细胞系相关产品：T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
UPCI:SCC154细胞系相关产品：PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞
H-2196细胞系相关产品：HTori 3细胞、HTR8细胞、EB-1细胞
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