"MKN74 Cell:人胃癌细胞系
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞背景资料：胃癌；女性
MNNG/HOS Clone F-5细胞系相关产品：SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞
TCam 2细胞系相关产品：COLO-320-HSR细胞、OCI-Ly 7细胞、LNT-229细胞
CNE2Z细胞系相关产品：LOU-NH-91细胞、COS-1细胞、CNE细胞
H341细胞系相关产品：MTEC1细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞、MDAMB435细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MKN74 Cell:人胃癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Buffalo Rat Liver-3A细胞系相关产品：VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
MIA Paca2细胞系相关产品：HUT-28细胞、rRTEC细胞、BL2141细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品：MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
MLE 12细胞系相关产品：MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
细胞生长特性：贴壁
MKN74 Cell:人胃癌细胞系
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞形态特性：详见细胞说明书
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞
MCA 205细胞系相关产品：SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
NCI-H2023细胞系相关产品：G-292细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HOS (TE85)细胞
87 MG细胞系相关产品：Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
Hs 895 T细胞系相关产品：CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
alpha TC1.6细胞系相关产品：HO1N1细胞、MIN-6细胞、BC-024细胞
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
MKN74 Cell:人胃癌细胞系
SKES-1细胞系相关产品：EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
AgC11x3A细胞系相关产品：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞
KRC Y细胞系相关产品：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
A-20细胞系相关产品：EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
hFOB 1.19细胞系相关产品：HTR8细胞、MiaPaCa2细胞、THP-1(ATCC)细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞系相关产品：MeWo细胞、HCC-9724细胞、H-520细胞
HT-55细胞系相关产品：BT-474细胞、NS1/1-Ag4.1细胞、HLEB-3细胞
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
Colo741细胞系相关产品：KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
SUM-159PT细胞系相关产品：Hs683细胞、OCI-LY-3细胞、LC2/Ad细胞
OCI-AML3细胞系相关产品：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
L Wnt-3A细胞系相关产品：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞
Fu97细胞系相关产品：KRC/Y细胞、T 84细胞、LN 229细胞
OCI-LY-8细胞系相关产品：SKO007细胞、NCI-H2591细胞、HOP-62细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
RPMI 8226细胞系相关产品：LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞
NW-38细胞系相关产品：Y3-Ag1.2.3细胞、BEAS-2B细胞、Mevo细胞
KY-270细胞系相关产品：B78细胞、H1688细胞、COV362细胞
BEAS2B细胞系相关产品：JOSK-M细胞、MCA 38细胞、WM-239-A细胞
SNU251细胞系相关产品：LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
PNT1/A细胞系相关产品：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞
LWnt3A细胞系相关产品：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
PANC-08-13细胞系相关产品：SUM102细胞、JROECL21细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞
MCF.7细胞系相关产品：SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
BHK 21细胞系相关产品：NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞系相关产品：NCI-H-69细胞、WI38细胞、H-292细胞
MRC5细胞系相关产品：SKNBE-1细胞、DSL6A/C1细胞、PCI-4B细胞
MES-SA/Dx5细胞系相关产品：Glioma-261细胞、B16-F1细胞、HANK1细胞
NCIH2405细胞系相关产品：H-865细胞、SHG 44细胞、143TK-细胞
J774 A1细胞系相关产品：Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞
Hu-P-T4细胞系相关产品：COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品：3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞
LU-65M细胞系相关产品：OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞
WM-239-A细胞系相关产品：Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
SK-MEL-24细胞系相关产品：HL 60细胞、EM-3细胞、NuTu 19细胞
DHL-4细胞系相关产品：NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞
LA795细胞系相关产品：Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
SU86-86细胞系相关产品：H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
MV3细胞系相关产品：TE7细胞、IHH-4细胞、RD-2细胞
NGP细胞系相关产品：CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
MKN74 Cell:人胃癌细胞系
HCC827细胞系相关产品：CAL 148细胞、CHO-S细胞、NTERA-2/D1细胞
P31/FUJ细胞系相关产品：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
Ramos-RA1细胞系相关产品：H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
SW-948细胞系相关产品：SW 1573细胞、CL-34细胞、SKG-3a细胞
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
28SC细胞系相关产品：CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞
FOXNY细胞系相关产品：B16/F1细胞、P815细胞、251 MG细胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞
QG-56细胞系相关产品：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
GM03671C细胞系相关产品：JTC-28细胞、MCF7ADR细胞、U-118 MG细胞
HuT 78细胞系相关产品：LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
WI38细胞系相关产品：NCIH748细胞、RMa-bm细胞、HCC-1500细胞
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