SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系

"SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系
细胞背景资料：SK-N-SH细胞系由J.L.Bieder建系，它与SK-N-MC所不同的是倍增时间较长且多巴胺-β-羟基酶水平较高。 SK-N-SH在细胞介导的细胞毒性试验中用作靶细胞系。
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
OVCAR.3细胞系相关产品：Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞
U138MG细胞系相关产品：HT3细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MSTO-211 H细胞
LMH细胞系相关产品：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞
细胞生长：贴壁
SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
细胞传代方法：１：２传代
University of Arizona Cell Culture-893细胞系相关产品：GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
CFPAC1细胞系相关产品：PJ34细胞、143B TK-细胞、G-402细胞
A2780S细胞系相关产品：OE-33细胞、3T3 clone A31细胞、WSU-DLCL2细胞
HCT 116细胞系相关产品：H1694细胞、MOLT-16细胞、Metastatic Variant-522细胞
OSC19细胞系相关产品：BL-6细胞、SEG-1细胞、SU86_86细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系
细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：上皮细胞样
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
RPMI 2650细胞系相关产品：JIMT细胞、HuLEC-5a细胞、H-735细胞
RBE4细胞系相关产品：B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞
HSF细胞系相关产品：C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
IMR90细胞系相关产品：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
FAK+/+细胞系相关产品：NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
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HDQ-P1细胞系相关产品：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞
TE-6细胞系相关产品：SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞
SK-SH-SY5Y细胞系相关产品：QGY-7701细胞、SKO007细胞、RS4;11细胞
SNU-620细胞系相关产品：DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞
SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系
KTC1细胞系相关产品：VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
ZR-75-30细胞系相关产品：EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
JROECL21细胞系相关产品：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞
P3 88 D1细胞系相关产品：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞
MGC803细胞系相关产品：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
SN12C-PM6细胞系相关产品：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞
EB-2细胞系相关产品：Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
LLC-MK-2细胞系相关产品：A-9细胞、SN12CPM6细胞、NCI-H1734细胞
H-209细胞系相关产品：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
NCI-SNU-601细胞系相关产品：U87 MG细胞、NIH3T3-L1细胞、H2591细胞
Granta-519细胞系相关产品：RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞
GM02219细胞系相关产品：KMY1022细胞、KP-2细胞、MDA 231-LM2-4175细胞
H1792细胞系相关产品：IM9细胞、Caco-2BBe细胞、MRC-V细胞
BJA-B-1细胞系相关产品：GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞
H-747细胞系相关产品：HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
HMC细胞系相关产品：CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
CCD18细胞系相关产品：T-98G细胞、IM9细胞、NCI-H2110细胞
MV522细胞系相关产品：PANC-28细胞、MCF-10A细胞、JROECL 33细胞
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
HT-29细胞系相关产品：HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
PG-4 (S+L-)细胞系相关产品：SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞
Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
H-1672细胞系相关产品：PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
HP615细胞系相关产品：Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞
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ROS 17/2.8细胞系相关产品：HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
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NCI-H2405细胞系相关产品：MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
EHEB细胞系相关产品：KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞
I90细胞系相关产品：MES 13细胞、SW1463细胞、INS-1细胞
NCI.H226细胞系相关产品：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞
GM04680细胞系相关产品：PL11细胞、KYSE270细胞、WSU-HN13细胞
H9c2细胞系相关产品：DU_145细胞、HOS(TE85)细胞、FOX-NY细胞
KMM-1细胞系相关产品：MCF12F细胞、RPMI 2650细胞、CCRFCEM细胞
B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
BMF细胞系相关产品：TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
GA-10细胞系相关产品：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
HKBML细胞系相关产品：HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：Hs 766细胞、H-676细胞、RPVSMC细胞
INS-1E细胞系相关产品：AA-Mel细胞、Ramos (RA)细胞、PL-45细胞
Hs-27细胞系相关产品：SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
OCIAML2细胞系相关产品：DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞系相关产品：NFHIOSE-29细胞、A 2058细胞、H-2347细胞
NG 108-15细胞系相关产品：GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞
KYSE-450细胞系相关产品：MHHCALL2细胞、LA-N-1细胞、SW480细胞
SK-N-SH epithelioid cells人神经母细胞瘤细胞系
SUDHL-2细胞系相关产品：LP-1细胞、SK-N-BE-2细胞、8226细胞
BE2M17细胞系相关产品：LLC-PK-1细胞、NOMO1细胞、U-266 AR1细胞
GM01232细胞系相关产品：Tu212细胞、HCC-1187细胞、C-8161细胞
HSF2细胞系相关产品：ssMCF-7细胞、769P细胞、RMG1细胞
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