BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系

"BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系
细胞背景资料：该细胞１９７８年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系，源自一位７２岁患有乳腺导管癌的白人女性，来源组织包括乳头及浸润导管。该细胞形态包括上皮样细胞及多核巨细胞，可分泌一种粘性物质。
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
SCH细胞系相关产品：SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞
HeLa-229细胞系相关产品：HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
P3 88 D1细胞系相关产品：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
细胞生长：贴壁
BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-７０℃~-１９６℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-７０℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过０~２０℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。１ml冻存细胞使用１０~２０ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在３×１０(５)活细胞/ml；培养细胞１２到２４小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml冻存细胞加入到大约２５ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约８０x离心２到３分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为３×１０(５)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约１０１２个，可以区分为２００多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G１期开始时一个确定的点G０点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法：１：２传代
H-28细胞系相关产品：NCIH2126细胞、NCI-H2228细胞、UACC-812细胞
SNU-182细胞系相关产品：B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞
T. T细胞系相关产品：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：上皮样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
SCL-2细胞系相关产品：BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品：Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
KU1919细胞系相关产品：MC9细胞、NMC-G1细胞、Panc 04.03细胞
HR1K细胞系相关产品：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞
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SW 780细胞系相关产品：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
OAW 42细胞系相关产品：RMG-I细胞、ME-180细胞、RPMI no 8226细胞
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NCIH441细胞系相关产品：ASH-3细胞、HA细胞、A-204细胞
BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系
CAL12T细胞系相关产品：L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞
SJSA细胞系相关产品：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞
ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞
DLD 1细胞系相关产品：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
MDAMB361细胞系相关产品：HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞
D283MED细胞系相关产品：Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
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HOS/MNNG细胞系相关产品：H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
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Hs 821.T细胞系相关产品：RH-35细胞、SK Mel 24细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞
L78细胞系相关产品：L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
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BT-549 epithelioid cells人乳腺导管癌细胞系
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
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P3X63 Ag8细胞系相关产品：H-2291细胞、KYSE 180细胞、FRH-0201细胞
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