MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系

"MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：MCF-７细胞保留了多个分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物（domes）。该细胞含有Tx-４癌基因。肿瘤坏死因子α（TNFalpha）可以抑制MCF-７细胞的生长。抗雌激素处理细胞能调变IGFBP＇S的分泌。
细胞形态：上皮细胞样
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
EBC-1细胞系相关产品：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
C4 I细胞系相关产品：Alexander cells细胞、CWR-22rv1细胞、CC-LP-I细胞
NCI-H2196细胞系相关产品：MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞
细胞生长：贴壁
MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２传代，３-４天长满
A-72细胞系相关产品：MDA-157细胞、aTC1 Clone 6细胞、NU-GC-4细胞
Ca761细胞系相关产品：NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞
ME 180细胞系相关产品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、RD 2细胞、IR 983F细胞
MT2细胞系相关产品：HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：上皮样
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
H-220细胞系相关产品：Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞
NCIH1092细胞系相关产品：RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞
STTG1细胞系相关产品：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞
Ramos.2G6.4C10细胞系相关产品：Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞
SNU-449细胞系相关产品：NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞
Panc-02细胞系相关产品：UM-UC3细胞、LC-2 ad细胞、MARC-145细胞
NCI-SNU-423细胞系相关产品：CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
MOLM-13细胞系相关产品：NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
PIG1细胞系相关产品：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞
MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品：HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
KY-270细胞系相关产品：B78细胞、H1688细胞、COV362细胞
Eca109细胞系相关产品：H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞
J-774细胞系相关产品：IMR 90细胞、A9细胞、Rat-1细胞
CAOV4细胞系相关产品：G-292, clone A141B1细胞、Hs 766细胞、Panc08.13细胞
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B16-F0细胞系相关产品：Hs737T细胞、AK细胞、HOEC细胞
L 132细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞
MOVAS细胞系相关产品：SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
HEK293FT细胞系相关产品：U-87-MG细胞、251MG细胞、B16F10细胞
HBMEC细胞系相关产品：LNCaP clone FGC细胞、U-266 AR1细胞、LS-174T细胞
NCI-H2171细胞系相关产品：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
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GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞
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L-6 myoblast细胞系相关产品：P30-OHKUBO细胞、SKCO-1细胞、TALL-104细胞
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NCIADRRES细胞系相关产品：RWPE-1细胞、CEL细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞
AM38细胞系相关产品：RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
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GM637A细胞系相关产品：HO-8910 PM细胞、686LN-M4e细胞、Hs 746.T细胞
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D407 RPE细胞系相关产品：NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
RK 13细胞系相关产品：NCIH2405细胞、HNE3细胞、SNU601细胞
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RetroPack PT67细胞系相关产品：MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
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HM1900细胞系相关产品：Hs 636.T细胞、RFL6细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞
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HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
NS-1-Ag4-1细胞系相关产品：H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
MCF-7/ADR细胞系相关产品：CAL 62细胞、CRFK细胞、SCC9细胞
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
GM02131细胞系相关产品：NCTC-3960细胞、Rat Fetal Lung-6细胞、LICR-HN6细胞
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RD 2细胞系相关产品：SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
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Line 522细胞系相关产品：H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
MCF-7 epithelioid cells人乳腺癌细胞系
Hs 766.T细胞系相关产品：NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞
HCC-2935细胞系相关产品：746T细胞、3T3-A31细胞、A-375SM细胞
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