"AD-293 epithelioid cells人胚肾细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。 Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品:PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞 801-D细胞系相关产品:IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞 NPA细胞系相关产品:Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞 细胞生长:贴壁 AD-293 epithelioid cells人胚肾细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 细胞传代方法:1:2传代 DHL10细胞系相关产品:H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞 C41细胞系相关产品:HEK293-A细胞、C2A细胞、EMT6细胞 H-1092细胞系相关产品:Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞 MCA-38细胞系相关产品:MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞 MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 AD-293 epithelioid cells人胚肾细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:详见细胞说明书 培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。 OVCAR10细胞系相关产品:U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞 LPC-H12细胞系相关产品:SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞 TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品:NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞 NCI-H2591细胞系相关产品:AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞 Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品:WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞 IMR-90细胞系相关产品:LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞 6-10B细胞系相关产品:SK-ChA-1细胞、OVCA8细胞、SU-86-86细胞 SW 1116细胞系相关产品:WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞 OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞 NFS-60细胞系相关产品:Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞 AD-293 epithelioid cells人胚肾细胞系 TE671/RD细胞系相关产品:WB-F344细胞、NCIH345细胞、SNU739细胞 ChaGo K-1细胞系相关产品:UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞 Panc 4.03细胞系相关产品:WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞 OCILY7细胞系相关产品:SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞 SGC-996细胞系相关产品:Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞 Hs888Lu细胞系相关产品:COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞 Hs888Lu细胞系相关产品:COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞 HepG2细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞 Colo741细胞系相关产品:KYSE-410细胞、EnCa1细胞、TE671细胞 Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞 CCRFCEM细胞系相关产品:MM-1S细胞、SR786细胞、HTori:3细胞 SW-48细胞系相关产品:COLO 16细胞、H-2030细胞、B16 F1细胞 OCI-Ly7细胞系相关产品:NRK 49F细胞、HFT 8810细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞 LA-N-6(OAN)细胞系相关产品:Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞 GAK细胞系相关产品:RSC-364细胞、C-28I2细胞、SVEC4-10细胞 OV2008细胞系相关产品:NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞 RH7777细胞系相关产品:KALS-1细胞、HCC-827细胞、NCI-128细胞 L-428细胞系相关产品:NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品:SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞 PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞 NCM356细胞系相关产品:MDCK II细胞、REC1细胞、AK细胞 Panc_05_04细胞系相关产品:JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞 C2BBe1细胞系相关产品:PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞 REC1细胞系相关产品:MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞 Mv.1.Lu细胞系相关产品:YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞 P-19细胞系相关产品:HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞 TE9细胞系相关产品:GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞 Hi-five细胞系相关产品:HTh-74细胞、CAL851细胞、NCIH211细胞 PLC/PRF/5细胞系相关产品:Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞 Scott and White No. 13细胞系相关产品:NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞 KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞 Colon-38细胞系相关产品:CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞 SW1116细胞系相关产品:KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞 COLO 679细胞系相关产品:CAOV4细胞、BHK 21细胞、NCIH2066细胞 D-283 Med细胞系相关产品:KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞 Hk-2细胞系相关产品:B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞 CCD-19Lu细胞系相关产品:HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞 A-875细胞系相关产品:OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞 H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞 SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞 CACO2细胞系相关产品:PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞 H-1993细胞系相关产品:Panc02细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、293A细胞 Y3-Ag1,2,3细胞系相关产品:HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞 P31FUJ细胞系相关产品:DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞 NSC-34细胞系相关产品:CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞 WERI-Rb-1细胞系相关产品:HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞 Neuro 2a细胞系相关产品:A10细胞、HCC-95细胞、OLN 93细胞 LS180细胞系相关产品:SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞 C3H10T1/2 clone8细胞系相关产品:COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞 Eca-109细胞系相关产品:SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞 UO-31细胞系相关产品:Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞 AD-293 epithelioid cells人胚肾细胞系 NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞 HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、SUM149细胞、HPAF-II细胞 NCIH2030细胞系相关产品:DoHH-2细胞、Metastatic Variant 522细胞、SNU387细胞 TK+/- (clone 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