"JEG-3 epithelioid cells人绒毛膜癌细胞系 细胞背景资料:这是一株超三倍体人类细胞株 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 SKO007细胞系相关产品:L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞 A-875细胞系相关产品:OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞 Human Fetal Thymocyte-8810细胞系相关产品:HCC-1569细胞、H-69细胞、KATO III细胞 细胞生长:贴壁 JEG-3 epithelioid cells人绒毛膜癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。 细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满 Potorous tridactylus Kidney 1细胞系相关产品:Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞 MOLP8细胞系相关产品:D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞 McA-RH8994细胞系相关产品:LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞 MES-13细胞系相关产品:OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞 PK-136细胞系相关产品:NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 JEG-3 epithelioid cells人绒毛膜癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮样 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 NK-92细胞系相关产品:WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞 U-2OS细胞系相关产品:RT 112细胞、OLN93细胞、NS653细胞 HUVEC细胞系相关产品:QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞 GP5d细胞系相关产品:SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞 Panc 02细胞系相关产品:T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞 C666-1细胞系相关产品:AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞 NPA87细胞系相关产品:DU 145细胞、Sc-1细胞、SHEP1细胞 C666-1细胞系相关产品:AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞 MNNG细胞系相关产品:I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞 CCD19-Lu细胞系相关产品:UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞 JEG-3 epithelioid cells人绒毛膜癌细胞系 RC-K8细胞系相关产品:HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞 GI-1细胞系相关产品:SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞 NF639细胞系相关产品:MKN74细胞、MDAPCa-2b细胞、SJRH 30细胞 CPA 47细胞系相关产品:HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞 MC9细胞系相关产品:CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞 TCC-SUP细胞系相关产品:NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞 HCC 38细胞系相关产品:NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞 CHO-Lec1细胞系相关产品:H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞 JKT-1细胞系相关产品:HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞 Roswell Park Memorial Institute 7951细胞系相关产品:NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞 NOZC-1细胞系相关产品:F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞 Hs-600-T细胞系相关产品:H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞 HCC0202细胞系相关产品:B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞 A7r5细胞系相关产品:SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞 OCIAML3细胞系相关产品:BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞 SK-Mel1细胞系相关产品:PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞 Institute for Medical Research-90细胞系相关产品:CACO2细胞、NCIH2009细胞、NCI-H322T细胞 CALU 1细胞系相关产品:GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞 H-727细胞系相关产品:293A细胞、U251细胞、PK-13细胞 no-11细胞系相关产品:MiaPaca.2细胞、KMB-17细胞、HRIF细胞 HeLa细胞系相关产品:Panc2_03细胞、SK-N-SH细胞、PC-9S1细胞 T-CAM2细胞系相关产品:SUM-52PE细胞、Clone Y1细胞、H1993细胞 Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品:NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞 alpha TC1 clone 6细胞系相关产品:Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞 LC1/Sq细胞系相关产品:Hs 822.T细胞、Be-Wo细胞、HCC-1806细胞 LNCaP细胞系相关产品:Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞 DKMG细胞系相关产品:NR8383.1细胞、ECC 12细胞、Hs821T细胞 NCI-H774细胞系相关产品:UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞 Central Adrenergic TH-expressing a细胞系相关产品:MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞 HPF细胞系相关产品:2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞 H-358细胞系相关产品:PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞 MDA-134细胞系相关产品:CV1细胞、OACP4C细胞、LLC细胞 HCT8细胞系相关产品:P3 NS1 Ag4细胞、G361mel细胞、MDA MB231细胞 SMC-1细胞系相关产品:GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞 293 EBNA细胞系相关产品:Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞 AR4-IP细胞系相关产品:S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品:NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞 E.G7-OVA细胞系相关产品:EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞 SEM细胞系相关产品:LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞 F98细胞系相关产品:MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞 DHL-8细胞系相关产品:NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞 HeLa S3细胞系相关产品:NCI-H82细胞、H676B细胞、Mink细胞 P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品:TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞 H-1373细胞系相关产品:HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞 MDA2B细胞系相关产品:WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞 KMB 17细胞系相关产品:MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞 MZCRC1细胞系相关产品:PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞 HepG2/C3A细胞系相关产品:SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞 HT115细胞系相关产品:OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞 H2291细胞系相关产品:RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞 HEK293EBNA细胞系相关产品:OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞 JEG-3 epithelioid cells人绒毛膜癌细胞系 Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品:WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞 NK-92细胞系相关产品:WPMY1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、SU-DHL-4细胞 NCI H716细胞系相关产品:OCI-Ly10细胞、NU-GC-2细胞、SUDHL6细胞 HUV-EC-C细胞系相关产品:B16/F0细胞、CCD-33Co细胞、NCI-H1238细胞 "
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