"HPAC epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。 CHAGOK1细胞系相关产品:Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞 RMG-I细胞系相关产品:HMCB细胞、C3H-10T1/2细胞、293T/17细胞 RT-BM-1细胞系相关产品:HUC-1细胞、HCC1806细胞、GM 2132细胞 细胞生长:贴壁 HPAC epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 细胞传代方法:1:2传代 Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品:PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞 INS-1细胞系相关产品:BALL1细胞、22Rv1细胞、COLO 206细胞 LNCaP clone FGC细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞 P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品:OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞 SW-1783细胞系相关产品:FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 HPAC epithelioid cells人胰腺癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮样 造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢! SKMEL-31细胞系相关产品:NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞 F36P细胞系相关产品:MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 675T细胞系相关产品:L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞 D 407细胞系相关产品:HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞 GP-293细胞系相关产品:Mo7e细胞、NCI-522细胞、LCMS细胞 BT474细胞系相关产品:H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞 X63-Ag8-653细胞系相关产品:CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞 alpha TC1-6细胞系相关产品:Namalva细胞、H-1688细胞、NCIH2228细胞 SCH细胞系相关产品:SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞 HPAC epithelioid cells人胰腺癌细胞系 NCI-H1404细胞系相关产品:THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞 SHG-44细胞系相关产品:H4细胞、A253细胞、SF295细胞 ARO81细胞系相关产品:SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞 CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞 ACC-M细胞系相关产品:MCF10-A细胞、NFS60细胞、HN13细胞 NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞 NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞 C3A细胞系相关产品:TCC-SUP细胞、GAK细胞、CII细胞 MARC145细胞系相关产品:FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞 BE(2)M-17细胞系相关产品:P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞 Potorous tridactylus Kidney 1细胞系相关产品:Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞 BOWES细胞系相关产品:T 24细胞、MDA 435细胞、3T3-A31细胞 D-283 Med细胞系相关产品:KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞 COLO 680N细胞系相关产品:SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞 CV 1细胞系相关产品:hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞 NCI-841细胞系相关产品:AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞 HOS-143B细胞系相关产品:DSL6A/C1细胞、SK_N_FI细胞、RCCJF细胞 293T/17细胞系相关产品:SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞 Hs 852.T细胞系相关产品:IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞 PIGI细胞系相关产品:GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞 EFM-192B细胞系相关产品:NCIH548细胞、CEK细胞、Hs 578T细胞 NCIH1105细胞系相关产品:ST 486细胞、CT26.WT细胞、H-1299细胞 H.Ep.-2细胞系相关产品:SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞 LS-411细胞系相关产品:H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞 Anip 973细胞系相关产品:OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞 LS-1034细胞系相关产品:NCI-H2107细胞、OsACL细胞、A 549细胞 Hep-G2/C3A细胞系相关产品:alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞 NCI-H889细胞系相关产品:P3 88 D1细胞、MCF.10A细胞、BCAP37细胞 SVEC 4-10细胞系相关产品:H-711细胞、RMG-1细胞、GLC-82细胞 DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞 ES2细胞系相关产品:OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞 MDA.MB.435细胞系相关产品:B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞 RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞 HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞 N9细胞系相关产品:KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞 Verda reno细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、H9c2(2-1)细胞、KG1A细胞 HDMEC细胞系相关产品:Hs895.T细胞、GLC-82细胞、Karpas 422细胞 KASUMI6细胞系相关产品:NCIH1435细胞、OCI/AML-3细胞、RMG1细胞 Dunn LM8细胞系相关产品:343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs(mBMSCs)细胞 H2106细胞系相关产品:RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞 P30/0HK细胞系相关产品:UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞 M059J细胞系相关产品:Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞 YES-2细胞系相关产品:NCI-H889细胞、OCI-LY-18细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞 Rat Skin 1细胞系相关产品:UCLA SO M21细胞、B16BL-6细胞、CAL39细胞 SW 1271细胞系相关产品:J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞 D6P2T细胞系相关产品:HFL1细胞、SAS细胞、Hs 675.T细胞 UCLA SO M14细胞系相关产品:H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞 MC57G细胞系相关产品:HTR8svn细胞、MIA Paca2细胞、HT144细胞 Hs-746T细胞系相关产品:NOZAWA细胞、CCRF/CEM-C7细胞、EAhy926细胞 YD15细胞系相关产品:Hs940T细胞、Emory University-2细胞、SKNO-1细胞 H-2126细胞系相关产品:A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞 HPAC epithelioid cells人胰腺癌细胞系 NCL-H548细胞系相关产品:MOLM13细胞、HH [Human lymphoma]细胞、BEAS 2B细胞 NCI-SNU-C1细胞系相关产品:SH-SY5Y细胞、P3-X63-Ag8-653细胞、CAL 120细胞 C4 I细胞系相关产品:Alexander cells细胞、UMUC-3细胞、CCRF细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、B4G12细胞、TE6细胞 "
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