"C-33 A epithelioid cells人子宫颈癌细胞系 细胞背景资料:C-33A细胞株是N. Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株(参见ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态。 连续传代可以观察到核型不稳定。 存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB),但大小不正常。 P53表达上调,且有一个273位密码子的点突变导致Arg -> Cys的替换。 人乳头瘤病毒DNA及RNA阴性。 细胞形态:上皮细胞样 细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。 HEK-293H细胞系相关产品:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞 CCFSTTG1细胞系相关产品:CORL105细胞、HSAEC1-KT细胞、HCC2279细胞 HTR-8细胞系相关产品:NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞 细胞生长:贴壁 C-33 A epithelioid cells人子宫颈癌细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。 细胞传代方法:1:2传代 ZR-75-30细胞系相关产品:EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞 PNT1A细胞系相关产品:RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞 PANC-03-27细胞系相关产品:hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞 WC00079细胞系相关产品:A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞 P3X63 AG8-653细胞系相关产品:T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 C-33 A epithelioid cells人子宫颈癌细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮细胞样 细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。 NCIH1703细胞系相关产品:NK-10A细胞、Hs 683细胞、A-172MG细胞 B16F0细胞系相关产品:HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞 LCD细胞系相关产品:NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞 EB-2细胞系相关产品:Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞 NCI-H2452细胞系相关产品:SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞 ChaGo-K1细胞系相关产品:U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞 APRE-19细胞系相关产品:HuTu-80细胞、RAW2647细胞、OCI-LY-1细胞 HLE B-3细胞系相关产品:M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞 NTera2 cl.D1细胞系相关产品:PaTu8988s细胞、253J B-V细胞、CoC1细胞 NTERA-2/D1细胞系相关产品:RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 C-33 A epithelioid cells人子宫颈癌细胞系 H209细胞系相关产品:HN6细胞、SKHEP1细胞、SPCA1细胞 BMF细胞系相关产品:TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞 NCI-H2198细胞系相关产品:Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞 SNGM细胞系相关产品:H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞 SF 539细胞系相关产品:SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞 4-1st细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞 4-1st细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞 BEAS-2B细胞系相关产品:PA-1细胞、143TK-细胞、HCC0078细胞 Karpas 299细胞系相关产品:HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞 H-EMC-SS细胞系相关产品:BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞 SW-954细胞系相关产品:HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞 Lu-99A细胞系相关产品:P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞 RPMI8402细胞系相关产品:C-33 A细胞、MDCC MSB1细胞、Rat 1细胞 Tj-905细胞系相关产品:GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞 SKMEL3细胞系相关产品:H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞 SK-RC 52细胞系相关产品:BLO11细胞、McCoy细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞 CBRH7919细胞系相关产品:CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞 Hs27F细胞系相关产品:LWnt3A细胞、IPLB-Sf21-AE细胞、HLEpiC细胞 SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞 SKMEL5细胞系相关产品:C57 Mouse Tumor 93细胞、PC-3M-1E8细胞、293-EBNA1细胞 DF-1细胞系相关产品:H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞 IHHA-1细胞系相关产品:G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞 CCD-112 CoN细胞系相关产品:266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞 143B细胞系相关产品:JVM2细胞、Hs-695-T细胞、V 79-4细胞 Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品:Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞 YTMLC-90细胞系相关产品:ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞 H-1838细胞系相关产品:SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞 NKM-1细胞系相关产品:ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞 CC-LP-I细胞系相关产品:MES-SA Dx5细胞、NCIH2052细胞、OVHM细胞 B10BR细胞系相关产品:NCI-H838细胞、OVCA5细胞、IPEC-1细胞 XuanWei Lung 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