"TM4 epithelioid cells小鼠睾丸细胞系 细胞背景资料:该细胞在FSH的作用下cAMP产量增加,但对LH无反应;与原代Sertoli细胞相比,该细胞对FSH的反应性降低。据报道,该细胞组成性纤溶酶原激活物的产量很低,但可被FSH刺激产生,受维刺激可有大幅增高。该细胞可产生视黄醇结合蛋白、组织纤溶酶原激活物和转铁蛋白;表达FSH受体、雄激素受体和孕激素受体。鼠痘病毒阴性。 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 CEMC7细胞系相关产品:HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞 BE(2)M-17细胞系相关产品:P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞 FAO-1细胞系相关产品:LS 174 T细胞、CORL23细胞、NCI-H2330细胞 细胞生长:贴壁 TM4 epithelioid cells小鼠睾丸细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 血清必须贮存于–20~-70℃,若存放于4℃,请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶,可将40~45ml分装于无菌50ml离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10%,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室温下全溶后再分装,一般以50ml无菌离心管可分装40~45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏,而影响血清之品质。血清凝絮物:发生之原因有许多种,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成,这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物,可用离心3000rpm,5min去除,或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物,因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”:通常经过热处理之血清,沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”,常会误认为血清遭受污染,而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”,但在37℃环境下,又会使此沈淀物增多,更会误认为微生物之增殖,但以培养细菌之培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点应不会影响细胞之生长,但若怀疑此血清之品质,应立即停用,更换另一批号的血清。 细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周2-3次。 Cates 1B细胞系相关产品:KP2细胞、67NR细胞、A549细胞 NCI-H82细胞系相关产品:VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞 CALU1细胞系相关产品:LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞 HRA-19细胞系相关产品:NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞 H820细胞系相关产品:CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 TM4 epithelioid cells小鼠睾丸细胞系 细胞生长特性:贴壁生长 细胞形态特性:上皮样 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 HS 1.Tes细胞系相关产品:MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞 TK.10细胞系相关产品:HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞 HCC-9724细胞系相关产品:LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞 GC-2细胞系相关产品:OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞 KM12SM细胞系相关产品:OV90细胞、16-HBEo细胞、SW 948细胞 MV4;11细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞 A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞 74Int细胞系相关产品:RT-BM细胞、H-1581细胞、H6c7细胞 SJ-RH30细胞系相关产品:SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 EVSAT细胞系相关产品:MB49细胞、HCC0044细胞、PVEC细胞 TM4 epithelioid cells小鼠睾丸细胞系 Li-7细胞系相关产品:NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞 P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞 TGBC11T细胞系相关产品:Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞 Hs.27细胞系相关产品:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞 EJ 138细胞系相关产品:IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs(mUCMSCs)细胞 H-358细胞系相关产品:PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞 H-358细胞系相关产品:PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞 CHP 100细胞系相关产品:PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞 NCIH1993细胞系相关产品:3AA细胞、KPL4细胞、HUV-EC-C细胞 COV-434细胞系相关产品:HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞 293EBNA细胞系相关产品:GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞 D-341Med细胞系相关产品:MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞 Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品:NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞 HConEpic细胞系相关产品:Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞 KG-1细胞系相关产品:SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞 K-562细胞系相关产品:GFP-Olig2细胞、Colo205细胞、H3255细胞 RGC5细胞系相关产品:HeLa.S3细胞、L- cell细胞、SW839细胞 SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞 MSCs(mUCMSCs)细胞系相关产品:NCIH64细胞、NIH:OVCAR4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞 VMCUB-1细胞系相关产品:Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞 NCI-H920细胞系相关产品:HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞 M14细胞系相关产品:SK MEL-28细胞、T1-73细胞、Douglas Foster-1细胞 RBVEC细胞系相关产品:OCI AML2细胞、HDLM2细胞、HBZY 1细胞 Melanoma 14细胞系相关产品:T. T细胞、NSC-34细胞、OVCAR5细胞 OEC33细胞系相关产品:ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞 IAR20细胞系相关产品:SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞 MHCC97-L细胞系相关产品:SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞 Line 870 Emory University-4细胞系相关产品:CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞 PL-5细胞系相关产品:CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞 H-929细胞系相关产品:C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞 VK2/E6E7细胞系相关产品:ESC细胞、H660细胞、C17细胞 Soleus clone 8细胞系相关产品:Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞 Huh-7.5.1细胞系相关产品:L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞 SK-N-AS细胞系相关产品:FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞 P3X63 Ag8细胞系相关产品:H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞 A431细胞系相关产品:HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞 SK_N_BE2C细胞系相关产品:MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞 Wien133细胞系相关产品:CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞 Hs 766T细胞系相关产品:HRVEC细胞、MDA MB 436细胞、WM-266-4细胞 Hs819.T细胞系相关产品:SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞 NCI-H865细胞系相关产品:SU-DHL-6细胞、AZ-521细胞、SU-DHL-2细胞 TE 85 ClF-5细胞系相关产品:IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞 CT26-clone 25细胞系相关产品:MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞 EOC 20细胞系相关产品:SK-N-BE(1)n细胞、HRMC细胞、CORL23细胞 NOMO1细胞系相关产品:Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞 293 HEK细胞系相关产品:FAO-1细胞、Huh 7.5细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞 MES-SA Dx5细胞系相关产品:Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞 DI-TNC1细胞系相关产品:SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞 8305C细胞系相关产品:MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞 NMCG-1细胞系相关产品:GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞 NCM460细胞系相关产品:Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞 TM4 epithelioid cells小鼠睾丸细胞系 LM8细胞系相关产品:ECV 304细胞、PK-13细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞 Jurkat Clone E6-1细胞系相关产品:CNE2Z细胞、H295R细胞、UPCI:SCC90细胞 WM115mel细胞系相关产品:Panc203细胞、DLD 1细胞、HEP3B2细胞 HCC9724细胞系相关产品:BIU87细胞、ST-2细胞、PE/CA-PJ34细胞 "
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