"HC11 epithelioid cells细胞系 细胞背景资料:详见相关文献介绍 细胞形态:上皮细胞样 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 DC2.4细胞系相关产品:Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞 Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞 UO-31细胞系相关产品:Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞 细胞生长:贴壁 HC11 epithelioid cells细胞系 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。 细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 COV-434细胞系相关产品:HT-1376细胞、PNT-1A细胞、B16BL6细胞 SK MEL 5细胞系相关产品:OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞 EBTr (NBL-4)细胞系相关产品:Hep3B细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、HHL5细胞 JCA-1细胞系相关产品:NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞 Kuramochi细胞系相关产品:OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 HC11 epithelioid cells细胞系 细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分 细胞形态特性:详见细胞说明书 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 786-0细胞系相关产品:NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞 RBMVEC细胞系相关产品:DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞 HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞 NCI-H-295细胞系相关产品:KM932细胞、LN-229细胞、NCCIT细胞 HN6细胞系相关产品:HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞 NCTC 3960细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞 P3X63 AG8-653细胞系相关产品:T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞 HeLaS3细胞系相关产品:KP-N-RT-BM细胞、HCC0202细胞、AC29细胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品:UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞 Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞 HC11 epithelioid cells细胞系 SUDHL4细胞系相关产品:3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞 H-2342细胞系相关产品:HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞 BTI-Tn-5B1-4细胞系相关产品:RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞 RIN-m5F细胞系相关产品:NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞 Panc 1细胞系相关产品:PA317细胞、TE5细胞、OCI-Ly01细胞 VMRCLCD细胞系相关产品:L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞 VMRCLCD细胞系相关产品:L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞 J82 COT细胞系相关产品:TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞 FaDu细胞系相关产品:Farage细胞、D-407细胞、SK-MES-1细胞 PC 61 5.3细胞系相关产品:NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞 QSG-7701细胞系相关产品:SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞 CALU 1细胞系相关产品:GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞 ARH77细胞系相关产品:H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞 CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞 LC-1细胞系相关产品:NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞 AML193细胞系相关产品:NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞 HPAF/CD18细胞系相关产品:MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞 C17细胞系相关产品:MDA-453细胞、SK-MEL-31细胞、Tn5B1-4细胞 A 2780 CP细胞系相关产品:SW-620细胞、SKNBE-1细胞、NCI-H1838细胞 MESSA/Dx5细胞系相关产品:KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞 MDA361细胞系相关产品:HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞 mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞 SACC-LM细胞系相关产品:HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞 SK BR 03细胞系相关产品:3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞 Hs 729T细胞系相关产品:MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞 OVHM细胞系相关产品:MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞 OB2细胞系相关产品:Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞 NPC-039细胞系相关产品:MCF 7B细胞、PE/CA-PJ-34细胞、Sp2/O-Ag14细胞 HRA19细胞系相关产品:UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞 MDA-MB453细胞系相关产品:CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞 SUM149-PT细胞系相关产品:MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞 Mouse Podocyte Clone-5细胞系相关产品:DSL-6A/C1细胞、HCEC-12细胞、U-251细胞 A2780 CP70细胞系相关产品:Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞 NB4细胞系相关产品:Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞 IOSE-Mar细胞系相关产品:4T1-A细胞、GM02132细胞、SEG1细胞 P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品:NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞 SPCA-1细胞系相关产品:Hs-688A-T细胞、BC-020细胞、CAL62细胞 PLC8024细胞系相关产品:LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞 HNE-2细胞系相关产品:KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞 RPMI 8226细胞系相关产品:LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞 PC-3M-1E8细胞系相关产品:OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞 KPL-4细胞系相关产品:NCIH1417细胞、SW626细胞、BMDC细胞 HOS TE85细胞系相关产品:Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞 BT-20细胞系相关产品:Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞 HASMC细胞系相关产品:HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞 LCD细胞系相关产品:NCI-SNU-520细胞、ISHI细胞、GM12878细胞 Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞 TK.10细胞系相关产品:HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞 C26细胞系相关产品:LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞 Caki2细胞系相关产品:BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞 HBL 100细胞系相关产品:RKOE6细胞、HCT 8细胞、ZR751细胞 HC11 epithelioid cells细胞系 MeT-5A细胞系相关产品:A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞 RC-2细胞系相关产品:HR-1细胞、Lu-65细胞、C-32细胞 U2OS细胞系相关产品:Hela-Ap-1细胞、P19细胞、PLC PRF 5细胞 HCC-1599细胞系相关产品:B/C3T3细胞、373 MG细胞、HEK AD293细胞 "
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